β2-微球蛋白檢測試劑盒（膠乳增強免疫比濁法）注冊技術(shù)審查指導(dǎo)原則（2016年第29號）

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β2-微球蛋白檢測試劑盒（膠乳增強免疫
比濁法）注冊技術(shù)審查指導(dǎo)原則

本指導(dǎo)原則旨在指導(dǎo)注冊申請人對β2-微球蛋白（β2-Microglobulin,β2-MG）檢測試劑盒（膠乳增強免疫比濁法）注冊申報資料的準(zhǔn)備及撰寫，同時也為技術(shù)審評部門審評注冊申報資料提供參考。

本指導(dǎo)原則是對β2-微球蛋白檢測試劑盒（膠乳增強免疫比濁法）的一般要求，申請人應(yīng)依據(jù)產(chǎn)品的具體特性確定其中內(nèi)容是否適用，若不適用，需具體闡述理由及相應(yīng)的科學(xué)依據(jù)，并依據(jù)產(chǎn)品的具體特性對注冊申報資料的內(nèi)容進行充實和細化。

本指導(dǎo)原則是供申請人和審查人員使用的指導(dǎo)文件，不涉及注冊審批等行政事項，亦不作為法規(guī)強制執(zhí)行，如有能夠滿足法規(guī)要求的其他方法，也可以采用，但應(yīng)提供詳細的研究資料和驗證資料。應(yīng)在遵循相關(guān)法規(guī)的前提下使用本指導(dǎo)原則。

本指導(dǎo)原則是在現(xiàn)行法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)體系及當(dāng)前認知水平下制定的，隨著法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)體系的不斷完善和科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，本指導(dǎo)原則相關(guān)內(nèi)容也將適時進行調(diào)整。

一、適用范圍

β2-微球蛋白檢測試劑盒（膠乳增強免疫比濁法）是指基于免疫比濁反應(yīng)的原理，利用全自動生化分析儀、半自動生化分析儀、特定蛋白分析儀，對人血清、血漿或其他體液中的β2-微球蛋白含量進行體外定量分析的試劑。

依據(jù)《體外診斷試劑注冊管理辦法》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局令第5號）和《食品藥品監(jiān)管總局關(guān)于印發(fā)體外診斷試劑分類子目錄的通知》（食藥監(jiān)械管〔2013〕242號）, β2-微球蛋白檢測試劑盒（膠乳增強免疫比濁法）管理類別為Ⅱ類，分類代號為6840。

目前β2-微球蛋白含量的測定方法主要是基于抗原抗體反應(yīng)的免疫方法，從檢測范圍、檢測成本、便利性等方面考慮，目前臨床采用最多的方法是膠乳增強免疫比濁法，其次是化學(xué)發(fā)光法，還有酶聯(lián)免疫吸附法、磁微粒酶聯(lián)免疫吸附法、時間分辨熒光免疫分析法和放射免疫法等。

從方法學(xué)上講，本指導(dǎo)原則僅適用于膠乳增強免疫比濁法。

原理：樣本中的β2-微球蛋白與膠乳顆粒上偶聯(lián)的β2-微球蛋白抗體特異性結(jié)合，形成免疫復(fù)合物，引起吸光度的上升，吸光度的變化程度與樣本中β2-微球蛋白的濃度成正比。通過與同樣處理的校準(zhǔn)品比較，可計算出樣本中β2-微球蛋白的含量。

二、注冊申報材料要求

（一）綜述資料

綜述資料主要包括產(chǎn)品預(yù)期用途、產(chǎn)品描述、方法學(xué)特征、生物安全性評價、研究結(jié)果總結(jié)以及同類產(chǎn)品上市情況介紹等內(nèi)容，應(yīng)符合《體外診斷試劑注冊管理辦法》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局令第5號）和《關(guān)于公布體外診斷試劑注冊申報資料要求和批準(zhǔn)證明文件格式的公告》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局公告2014年第44號）的相關(guān)要求。相關(guān)描述應(yīng)至少包含如下內(nèi)容：

1.產(chǎn)品預(yù)期用途及輔助診斷的臨床適應(yīng)癥背景情況

（1）β2-微球蛋白的生物學(xué)特征、結(jié)構(gòu)與功能、在體內(nèi)正常和病理狀態(tài)下的代謝途徑和存在形式。

（2）與預(yù)期用途相關(guān)的臨床適應(yīng)癥背景情況，如臨床相關(guān)疾病的發(fā)生、實驗室診斷方法等。

2.產(chǎn)品描述

包括產(chǎn)品所采用的技術(shù)原理、主要原材料的來源、質(zhì)量控制及制備方法、主要生產(chǎn)工藝過程及關(guān)鍵控制點，質(zhì)控品、校準(zhǔn)品的制備方法及溯源情況。

3.有關(guān)生物安全性方面的說明

如果體外診斷試劑中的主要原材料采用各種動物、病原體、人源的組織和體液等生物材料經(jīng)處理或添加某些物質(zhì)制備而成，為保證產(chǎn)品在運輸、使用過程中對使用者和環(huán)境的安全，研究者應(yīng)提供對上述原材料所采用的滅活等試驗方法的說明。人源性材料須對有關(guān)傳染?。℉IV、HBV、HCV等）病原體檢測予以說明，并提供相關(guān)的證明文件。

4.有關(guān)產(chǎn)品主要研究結(jié)果的總結(jié)和評價

5.參考文獻

6.其他

包括同類產(chǎn)品在國內(nèi)外批準(zhǔn)上市的情況，相關(guān)產(chǎn)品所采用的技術(shù)方法及臨床應(yīng)用情況，申請注冊產(chǎn)品與國內(nèi)外同類產(chǎn)品的異同等。

（二）主要原材料的研究資料（如需提供）

主要原材料的選擇、制備、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及實驗驗證研究資料；質(zhì)控品（如產(chǎn)品包含）、校準(zhǔn)品（如產(chǎn)品包含）的原料選擇、制備、定值過程及試驗資料；校準(zhǔn)品的溯源性文件，包括具體溯源鏈、實驗方法、數(shù)據(jù)及統(tǒng)計分析等詳細資料。

（三）主要生產(chǎn)工藝及反應(yīng)體系的研究資料（如需提供）

應(yīng)包含產(chǎn)品的工藝流程圖和關(guān)鍵控制點、確定反應(yīng)溫度、時間、緩沖體系比較等條件的研究資料、確定樣本和試劑盒組分加樣量的研究資料。

（四）分析性能評估資料

應(yīng)至少包括具體的研究方法、試驗數(shù)據(jù)、統(tǒng)計方法、研究結(jié)論等。性能評估時應(yīng)將試劑和所選用的校準(zhǔn)品、質(zhì)控品作為一個整體進行評價，評估整個系統(tǒng)的性能是否符合要求。

性能評估應(yīng)至少包括準(zhǔn)確度、精密度、線性范圍、分析特異性（抗干擾能力）、其他影響檢測的因素等。

1.準(zhǔn)確度

對測量準(zhǔn)確度的評價依次包括：與國家參考物（和/或國際參考物）的偏差分析、方法學(xué)比對、回收試驗等方法，申請人可根據(jù)實際情況選擇合理方法進行研究。

（1）與國家（國際）參考物值的比對研究

如果研究項目有相應(yīng)國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)或國際參考物質(zhì)，則使用國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)或國際參考物質(zhì)進行驗證，計算檢測結(jié)果與靶值的相對偏差。

（2）方法學(xué)比對

采用參考方法或國內(nèi)/國際普遍認為質(zhì)量較好的已上市同類試劑作為參比試劑，與擬申報試劑同時檢測一批患者樣品，至少40例樣本，40例樣本為在檢測濃度范圍內(nèi)不同濃度的人源樣品，且盡可能均勻分布。

在實施方法學(xué)比對前，確認兩者都分別符合各自相關(guān)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)后方可進行比對試驗。方法學(xué)比對時應(yīng)注意質(zhì)量控制、樣本類型、濃度分布范圍并對結(jié)果進行合理的統(tǒng)計學(xué)分析。

（3）回收試驗

在人源樣品中加入一定體積標(biāo)準(zhǔn)溶液或純品，按照產(chǎn)品技術(shù)要求的要求和實驗方法進行測試和計算。

2.精密度

測量精密度的評估應(yīng)至少包括生理和病理兩個濃度水平的樣本進行。

測量精密度的評價方法并無統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)可依，可根據(jù)不同的試劑特征或申請人的研究習(xí)慣進行。

3.線性范圍

建立試劑線性范圍所用的樣本基質(zhì)應(yīng)盡可能與臨床實際檢測的樣本相似，理想的樣本為分析物濃度接近預(yù)期測定上限的混合人血清，且應(yīng)充分考慮多倍稀釋對樣本基質(zhì)的影響。

4.分析特異性

應(yīng)明確已知干擾因素對測定結(jié)果的影響：可采用回收試驗對不同濃度的溶血、黃疸、脂血對檢測結(jié)果的影響進行評價，干擾物濃度的分布應(yīng)覆蓋人體生理及病理狀態(tài)下可能出現(xiàn)的物質(zhì)濃度。待評價的β2-微球蛋白樣本濃度至少應(yīng)為生理、病理2個水平，選取線性范圍內(nèi)有臨床代表性意義的濃度。

藥物干擾的研究可根據(jù)需要由申請人選擇是否進行或選擇何種藥物及其濃度進行。

5.其他需注意問題

（1）不同適用機型的反應(yīng)條件如果有差異應(yīng)分別詳述，不同樣本類型應(yīng)分別進行分析性能評估。原則上，不同的試劑比例應(yīng)分別提交分析性能評估報告。

分析性能評估報告應(yīng)明確所用儀器設(shè)備型號、校準(zhǔn)品、質(zhì)控品等的產(chǎn)品名稱、生產(chǎn)企業(yè)名稱、生產(chǎn)批號或注冊證等信息。

（2）校準(zhǔn)品溯源及質(zhì)控品賦值

校準(zhǔn)品、質(zhì)控品應(yīng)提供詳細的量值溯源資料。應(yīng)參照GB/T 21415—2008《體外診斷醫(yī)療器械 生物樣品中量的測量 校準(zhǔn)品和控制物質(zhì)賦值的計量學(xué)溯源性》的要求，提供企業(yè)（工作）校準(zhǔn)品及試劑盒配套校準(zhǔn)品定值及不確定度計算記錄，提供質(zhì)控品賦值及其靶值范圍確定的記錄。

（五）參考區(qū)間確定資料

參考區(qū)間確定所采用的樣本來源、確定方法及詳細的試驗資料。建議參考CLSI/NCCLS C28-A2。

（六）穩(wěn)定性研究研究

穩(wěn)定性研究資料主要涉及兩部分內(nèi)容，申報試劑的穩(wěn)定性和適用樣本的穩(wěn)定性研究。這里主要指試劑的穩(wěn)定性。通常包括保存期穩(wěn)定性（有效期）、加速穩(wěn)定性、開瓶穩(wěn)定性、復(fù)溶穩(wěn)定性等，申請人應(yīng)提供保存期穩(wěn)定性和開瓶穩(wěn)定性、加速穩(wěn)定性研究資料，干粉試劑同時應(yīng)提供復(fù)溶穩(wěn)定性研究資料（各3個生產(chǎn)批次）。穩(wěn)定性研究資料應(yīng)包括研究方法的確定依據(jù)、具體的實施方案、詳細的研究數(shù)據(jù)以及結(jié)論，保存期穩(wěn)定性研究，應(yīng)提供至少3批樣品在實際儲存條件下保存至成品有效期后的性能檢測報告資料。

對待檢測試劑做常規(guī)貯存穩(wěn)定性研究以及凍干品復(fù)溶后的穩(wěn)定性試驗。測定其在常規(guī)貯存條件下，按時間間隔（例如：有效期為1年的產(chǎn)品，穩(wěn)定性考察時間設(shè)置為：0，1、3、5、7、9、10、11、12、13、14個月的最后一天）進行檢測。

（七）臨床評價資料

臨床研究資料應(yīng)符合《關(guān)于發(fā)布體外診斷試劑臨床試驗技術(shù)指導(dǎo)原則的通告》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第16號）要求，同時研究資料的形式應(yīng)符合《體外診斷試劑注冊申報資料形式要求》臨床研究資料

有關(guān)的規(guī)定。下面僅對臨床實驗中的基本問題進行闡述。

1.研究方法

選擇境內(nèi)已批準(zhǔn)上市的性能不低于試驗用體外診斷試劑的同類產(chǎn)品作為參比試劑，采用試驗用體外診斷試劑（以下稱待評試劑）與之進行對比試驗研究，證明本品與已上市產(chǎn)品等效。

2.臨床試驗機構(gòu)的選擇

應(yīng)當(dāng)選定不少于2家（含2家）獲得國家食品藥品監(jiān)督管理總局資質(zhì)認可的臨床試驗機構(gòu)，臨床試驗機構(gòu)實驗操作人員應(yīng)有足夠的時間熟悉檢測系統(tǒng)的各環(huán)節(jié)（試劑、質(zhì)控及操作程序等），熟悉評價方案。在整個實驗中，待評試劑和參比試劑都應(yīng)處于有效的質(zhì)量控制下，最大限度保證試驗數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性及可重復(fù)性。

3.臨床試驗方案

臨床試驗實施前，研究人員應(yīng)從流行病學(xué)、統(tǒng)計學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)、檢驗醫(yī)學(xué)等多方面考慮，設(shè)計科學(xué)合理的臨床研究方案。各臨床研究機構(gòu)的方案設(shè)置應(yīng)保持一致，且保證在整個臨床試驗過程中遵循預(yù)定的方案實施，不可隨意改動。整個試驗過程應(yīng)在臨床研究機構(gòu)的實驗室內(nèi)并由本實驗室的技術(shù)人員操作完成，申報單位的技術(shù)人員除進行必要的技術(shù)指導(dǎo)外，不得隨意干涉實驗進程，尤其是數(shù)據(jù)收集過程。

試驗方案中應(yīng)確定嚴格的病例納入/排除標(biāo)準(zhǔn)，任何已經(jīng)入選的病例再被排除出臨床研究都應(yīng)記錄在案并明確說明原因。在試驗操作過程中和判定試驗結(jié)果時應(yīng)采用盲法以保證試驗結(jié)果的客觀性。各研究單位選用的參比試劑及所用機型應(yīng)保持一致，以便進行合理的統(tǒng)計學(xué)分析。

4.研究對象選擇

臨床試驗應(yīng)選擇具有特定癥狀/體征人群作為研究對象。企業(yè)在建立病例納入標(biāo)準(zhǔn)時，應(yīng)考慮到不同人群的差異，盡量覆蓋各類適用人群。在進行結(jié)果統(tǒng)計分析時，建議對各類人群分別進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析?？傮w樣本數(shù)不少于200例，建議異常值樣本數(shù)不少于80例。

血清/血漿應(yīng)明確抗凝劑的要求、存貯條件、可否凍融等要求及避免使用的樣本。實驗中，盡可能使用新鮮樣本，避免貯存。

樣本中待測物濃度應(yīng)覆蓋待評試劑線性范圍，且盡可能均勻分布。

如果待評試劑同時適用于血清或血漿樣本類型，可完成一個樣本類型（血清或血漿）不少于200例的臨床研究，同時可選至少100例血清或血漿同源樣本進行比對研究。

5.統(tǒng)計學(xué)分析

對臨床試驗結(jié)果的統(tǒng)計應(yīng)選擇合適的統(tǒng)計方法，如相關(guān)分析、線性回歸、絕對偏倚/偏差及相對偏倚/偏差分析等。對于對比實驗的等效性研究，最常用是對待評試劑和參比試劑兩組檢測結(jié)果的相關(guān)及線性回歸分析，應(yīng)重點觀察相關(guān)系數(shù)（r值）或判定系數(shù)（R2）、回歸擬合方程（斜率和y軸截距）等指標(biāo)。結(jié)合臨床試驗數(shù)據(jù)的正/偏態(tài)分布情況，建議統(tǒng)計學(xué)負責(zé)人選擇合理的統(tǒng)計學(xué)方法進行分析，統(tǒng)計分析應(yīng)可以證明兩種方法的檢測結(jié)果無明顯統(tǒng)計學(xué)差異。在臨床研究方案中應(yīng)明確統(tǒng)計檢驗假設(shè)，即評價待評試劑與參比試劑是否等效的標(biāo)準(zhǔn)。

6.臨床試驗總結(jié)報告撰寫

根據(jù)《體外診斷試劑臨床試驗技術(shù)指導(dǎo)原則》的要求，臨床試驗報告應(yīng)該對試驗的整體設(shè)計及各個關(guān)鍵點給予清晰、完整的闡述，應(yīng)該對整個臨床試驗實施過程、結(jié)果分析、結(jié)論等進行條理分明的描述，并應(yīng)包括必要的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)和統(tǒng)計分析方法。建議在臨床總結(jié)報告中對以下內(nèi)容進行詳述。

6.1臨床試驗總體設(shè)計及方案描述

6.1.1臨床試驗的整體管理情況、臨床試驗機構(gòu)選擇、臨床主要研究人員簡介等基本情況介紹。

6.1.2納入/排除標(biāo)準(zhǔn)、不同人群的預(yù)期選擇例數(shù)及標(biāo)準(zhǔn)。

6.1.3樣本類型，樣本的收集、處理及保存等。

6.1.4統(tǒng)計學(xué)方法、統(tǒng)計軟件、評價統(tǒng)計結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)。

6.2具體的臨床試驗情況

6.2.1待評試劑和參比試劑的名稱、批號、有效期及所用機型等信息；

6.2.2對各研究單位的病例數(shù)、人群分布情況進行總合，建議以列表或圖示方式給出具體例數(shù)及百分比。

6.2.3質(zhì)量控制，試驗人員培訓(xùn)、儀器日常維護、儀器校準(zhǔn)、質(zhì)控品運行情況，對檢測精密度、質(zhì)控品回收（或測量值）、抽查結(jié)果評估。

6.2.4具體試驗過程，樣本檢測、數(shù)據(jù)收集、樣本長期保存等。

6.3統(tǒng)計學(xué)分析

6.3.1數(shù)據(jù)預(yù)處理、對異常值或離群值的處理、研究過程中是否涉及對方案的修改。

6.3.2定量值相關(guān)性和一致性分析

用回歸分析驗證兩種試劑結(jié)果的相關(guān)性，以y=a+bx和R2的形式給出回歸分析的擬合方程，其中：y是待評試劑結(jié)果，x是參比試劑結(jié)果，b是方程斜率，a是y軸截距，R2是判定系數(shù)（通常要求R2≥0.95），同時應(yīng)給出b的95%（或99%）置信區(qū)間。

建議給出待評試劑與參比試劑之間的差值（絕對偏倚/偏差）及比值（相對偏倚/偏差）散點圖并作出95%置信區(qū)間分析。醫(yī)學(xué)決定水平附近相對偏倚/偏差應(yīng)不大于10%。

6.4討論和結(jié)論

對總體結(jié)果進行總結(jié)性描述并簡要分析試驗結(jié)果，對本次臨床研究有無特別說明，最后得出臨床試驗結(jié)論。

（八）產(chǎn)品風(fēng)險分析資料

根據(jù)YY/T 0316—2008《醫(yī)療器械 風(fēng)險管理對醫(yī)療器械的應(yīng)用》附錄D對該產(chǎn)品已知或可預(yù)見的風(fēng)險進行判定，企業(yè)還應(yīng)根據(jù)自身產(chǎn)品特點確定其他危害。針對產(chǎn)品的各項風(fēng)險，企業(yè)應(yīng)采取應(yīng)對措施，確保風(fēng)險降到可接受的程度。

（九）產(chǎn)品技術(shù)要求

產(chǎn)品技術(shù)要求應(yīng)符合《體外診斷試劑注冊管理辦法》和《體外診斷試劑注冊申報資料要求和批準(zhǔn)證明文件格式》以及《關(guān)于發(fā)布醫(yī)療器械產(chǎn)品技術(shù)要求編寫指導(dǎo)原則的通告》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第9號）的相關(guān)規(guī)定。

下面就技術(shù)要求中涉及的產(chǎn)品適用的引用文件和主要性能指標(biāo)等相關(guān)內(nèi)容作簡要敘述。

1.產(chǎn)品適用的相關(guān)文件

2.主要性能指標(biāo)

2.1外觀

應(yīng)與技術(shù)要求中表明的試劑外觀一致。這里可以包括試劑盒包裝外觀、試劑內(nèi)包裝外觀、試劑的外觀。

2.2裝量

試劑裝量應(yīng)不少于標(biāo)示裝量或規(guī)定限。

2.3試劑空白吸光度

用蒸餾水、去離子水或其他指定溶液作為空白加入工作試劑作為樣品測試時，試劑空白吸光度應(yīng)符合企業(yè)規(guī)定的要求(如：37℃，600nm，1cm)≤1.200A）。

2.4分析靈敏度

用醫(yī)學(xué)決定水平濃度或某一特定范圍濃度的樣品進行測試，記錄在試劑（盒）規(guī)定參數(shù)下產(chǎn)生的吸光度改變。換算為n單位（mg/L）反應(yīng)吸光度差值（ΔA），應(yīng)符合生產(chǎn)企業(yè)給定范圍。

2.5線性范圍

配置成至少5個稀釋濃度（xi）且接近線性范圍上限和下限的樣本，分別測試試劑盒，每個稀釋濃度測試1—3次，分別求出測定結(jié)果的均值（yi）。以稀釋濃度（xi）為自變量，以測定結(jié)果均值（yi）為因變量求出線性回歸方程。按公式（1）計算線性回歸的相關(guān)系數(shù)（r）。

稀釋濃度（xi）代入求出線性回歸方程，計算yi的估計值及yi與估計值的相對偏差或絕對偏差。

線性范圍應(yīng)至少達到但不限于（0.4—18.0）mg/L（下限不得高于0.4mg/L，上限不得低于18.0mg/L）

2.5.1相關(guān)系數(shù)（r）

線性相關(guān)系數(shù)r應(yīng)不小于0.990。

（線性范圍下限應(yīng)不低于產(chǎn)品的最低檢測限，不高于參考范圍下限）

2.5.2（0.4—18.0）mg/L范圍內(nèi)，線性絕對偏差或線性相對偏差應(yīng)不超過企業(yè)規(guī)定值。

2.6測量精密度

2.6.1重復(fù)性

分別用試劑（盒）測試生理和病理兩個濃度水平(例如：（2.5±0.5）mg/L和(10.0±2.0)mg/L)的樣本或質(zhì)控樣品，重復(fù)測試至少10次（n≥10），分別計算測量值的平均值（）和標(biāo)準(zhǔn)差（s）。計算變異系數(shù)（CV），應(yīng)不大于10%。

2.6.2批內(nèi)瓶間差（干粉或凍干試劑）

用線性范圍內(nèi)的樣本或質(zhì)控樣品測試同一批號的10瓶待檢試劑（盒），并計算10個測量值的平均值（1）和標(biāo)準(zhǔn)差（s1）。

用線性范圍內(nèi)的樣本或質(zhì)控樣品對相同批號的1個待檢試劑（盒）重復(fù)測試10次，計算結(jié)果的均值（2）和標(biāo)準(zhǔn)差（s2）。按公式（2）、（3）計算瓶間差的變異系數(shù)（CV）。

當(dāng)s1＜s2時，令CV=0

每個濃度下試劑（盒）批內(nèi)瓶間差均應(yīng)不大于5%。

2.6.3批間差

用3個不同批號的試劑分別測試線性范圍內(nèi)的樣本或質(zhì)控樣品，每個批號測試3次，分別計算每批3次測定的均值(i=1,2,3)，按公式（4）、（5）計算相對極差（R）。

試劑（盒）批間差相對極差應(yīng)不大于10%。

2.7準(zhǔn)確度

2.7.1相對偏差

用試劑盒測定用評價常規(guī)方法的參考物質(zhì)或有證參考物質(zhì)或由參考方法定值的高、中、低三個濃度的人源樣品，測定值與標(biāo)示值偏差應(yīng)≤10%。

2.7.2比對試驗

用待測試劑盒與申請人選定的分析系統(tǒng)（已在國內(nèi)上市）分別檢測不少于40個在檢測范圍內(nèi)的人源樣品，用線性回歸方法計算兩組結(jié)果的相關(guān)系數(shù)r2≥0.95, 偏倚的百分比應(yīng)符合企業(yè)規(guī)定的要求。

2.7.3回收試驗

在人源樣品中加入一定體積標(biāo)準(zhǔn)溶液或純品，按照產(chǎn)品技術(shù)要求的要求和實驗方法進行測試和計算。

2.7.4用質(zhì)控品/校準(zhǔn)品做相對偏差

所用質(zhì)控品、校準(zhǔn)品品牌應(yīng)符合產(chǎn)品技術(shù)要求規(guī)定或企業(yè)聲明。

2.7.5用校準(zhǔn)品做回收試驗

所用校準(zhǔn)品品牌應(yīng)符合產(chǎn)品技術(shù)要求規(guī)定或企業(yè)聲明。

2.8穩(wěn)定性

凍干品應(yīng)進行復(fù)溶穩(wěn)定性試驗。

2.9校準(zhǔn)品和質(zhì)控品的性能指標(biāo)（如產(chǎn)品中包含）

應(yīng)至少包含外觀、裝量、準(zhǔn)確性、均一性。凍干型校準(zhǔn)品和質(zhì)控品還應(yīng)檢測批內(nèi)瓶間差和復(fù)溶穩(wěn)定性。

2.9.1外觀

應(yīng)與技術(shù)要求中表明的試劑外觀一致。這里可以包括試劑盒包裝外觀、試劑內(nèi)包裝外觀、試劑的外觀。

2.9.2裝量

試劑裝量應(yīng)不少于標(biāo)示裝量或規(guī)定限。

2.9.3準(zhǔn)確性

比對試驗

用試劑盒與待測校準(zhǔn)品建立的分析系統(tǒng)與申請人選定的分析系統(tǒng)（已在國內(nèi)上市）分別檢測不少于40個在檢測范圍內(nèi)的人源樣品，用線性回歸方法計算兩組結(jié)果的相關(guān)系數(shù)r2≥0.95,相對偏差≤10%。

2.9.4均一性

采用試劑（盒）測試待檢測的校準(zhǔn)品或質(zhì)控品，重復(fù)測試至少10次（n≥10），分別計算測量值的平均值（）和標(biāo)準(zhǔn)差（s）。計算變異系數(shù)（CV）值應(yīng)不大于5%。

對于凍干型校準(zhǔn)品或質(zhì)控品，需要對其“批內(nèi)瓶間差”及“批間差”進行測定：

2.9.4.1批內(nèi)瓶間差

用檢測試劑（盒）測試同一批號的10瓶待檢凍干型校準(zhǔn)品或質(zhì)控品，并計算10個測量值的平均值（1）和標(biāo)準(zhǔn)差（s1）。計算變異系數(shù)（CV）值應(yīng)不大于5%。

2.9.4.2批間差

用檢測試劑（盒）測試3個不同批號的待檢凍干型校準(zhǔn)品或質(zhì)控品，每個批號測試3次，分別計算每批3次測定的均值xi(i=1,2,3)，并計算相對極差（R）應(yīng)不大于10%。

2.9.5穩(wěn)定性

凍干品應(yīng)進行復(fù)溶穩(wěn)定性試驗。

（十）產(chǎn)品注冊檢驗報告

首次申請注冊的β2-微球蛋白檢測試劑盒（膠乳增強免疫比濁法）應(yīng)該在具有相應(yīng)醫(yī)療器械檢驗資質(zhì)和承檢范圍的醫(yī)療器械檢測機構(gòu)進行產(chǎn)品的注冊檢驗。

（十一）產(chǎn)品說明書

說明書承載了產(chǎn)品預(yù)期用途、試驗方法、檢測結(jié)果解釋以及注意事項等重要信息，是指導(dǎo)使用人員正確操作、臨床醫(yī)生準(zhǔn)確理解和合理應(yīng)用試驗結(jié)果的重要技術(shù)性文件。產(chǎn)品說明書的格式應(yīng)符合《關(guān)于發(fā)布體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則的通告》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014第17號）的要求。結(jié)合《體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則》的要求，下面對β2-微球蛋白檢測試劑盒（膠乳增強免疫比濁法）說明書的重點內(nèi)容進行詳細說明。

1.【產(chǎn)品名稱】

（1）試劑（盒）名稱

試劑名稱由三部分組成：被測物名稱、用途、方法或原理。例如：β2-微球蛋白檢測試劑盒（膠乳增強免疫比濁法）

2.【包裝規(guī)格】

（1）包裝規(guī)格應(yīng)明確單、雙試劑類型；

（2）包裝規(guī)格應(yīng)明確裝量（如××mL；××人份）；

（3）帶有校準(zhǔn)品或質(zhì)控品應(yīng)明確標(biāo)識；

（4）與產(chǎn)品技術(shù)要求中所列的包裝規(guī)格一致；

（5）如不同包裝規(guī)格有與之特定對應(yīng)的機型，應(yīng)同時明確適用機型。

3.【預(yù)期用途】

應(yīng)至少包括以下幾部分內(nèi)容：

（1）說明試劑盒用于體外定量檢測人血清、血漿或其他體液中β2-微球蛋白的含量，同時應(yīng)明確與目的檢測物相關(guān)的臨床適應(yīng)癥背景情況。

（2）β2-微球蛋白含量異常情況常見于哪些疾病，其升高或降低可能有哪些醫(yī)學(xué)解釋。

作為支持性資料，申請人應(yīng)提供由教科書、臨床專著、核心期刊文獻或英文SCI文獻等有關(guān)臨床適應(yīng)癥背景的資料。

4.【檢驗原理】

應(yīng)結(jié)合產(chǎn)品主要成分簡要說明檢驗的原理、方法，必要時可采取圖示方法表示。

例如：樣本中的β2-微球蛋白與膠乳顆粒偶聯(lián)的β2-微球蛋白抗體特異性結(jié)合，形成免疫復(fù)合物，引起吸光度的上升，吸光度的變化程度與樣本中β2-微球蛋白的濃度成正比。通過與同樣處理的校準(zhǔn)品比較，可計算出樣本中β2-微球蛋白的含量。

5.【主要組成成分】

5.1 對于產(chǎn)品中包含的試劑組分：

5.1.1說明名稱、數(shù)量及在反應(yīng)體系中的比例或濃度，如果對于正確的操作很重要，應(yīng)提供其生物學(xué)來源、活性及其他特性。

5.1.2對于多組分試劑盒，明確說明不同批號試劑盒中各組分是否可以互換。

5.1.3如盒中包含耗材，應(yīng)列明耗材名稱、數(shù)量等信息。

5.2對于產(chǎn)品中不包含，但對該試驗必需的試劑組分，說明書中應(yīng)列出此類試劑的名稱、純度，提供稀釋或混合方法及其他相關(guān)信息。

5.3對于校準(zhǔn)品和質(zhì)控品（若配有）：

5.3.1說明主要組成成分及其生物學(xué)來源。

5.3.2注明校準(zhǔn)品的定值及其溯源性，溯源性資料應(yīng)寫明溯源的最高級別（如有標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)或參考物質(zhì)，應(yīng)包括標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)或參考物質(zhì)的發(fā)布單位及編號)。

5.3.3注明質(zhì)控品的靶值范圍。如靶值范圍為批特異，可注明批特異，并附單獨的靶值單。質(zhì)控品應(yīng)明確靶值和可接受范圍。

6.【儲存條件及有效期】

（1）對試劑的效期穩(wěn)定性、復(fù)溶穩(wěn)定性（如有）、開瓶穩(wěn)定性等信息作詳細介紹。包括環(huán)境溫濕度、避光條件等。

（2）不同組分保存條件及有效期不同時，應(yīng)分別說明，產(chǎn)品總有效期以其中效期最短的為準(zhǔn)。

注：保存條件不應(yīng)有模糊表述，如“常溫”、“室溫”。

7.【適用儀器】

（1）說明可適用的儀器，并提供與儀器有關(guān)的必要信息以便用戶能夠作出最好的選擇。

（2）應(yīng)寫明具體儀器型號。

8.【樣本要求】

應(yīng)在以下幾方面進行說明：

（1）適用的樣本類型。

（2）在樣本收集過程中的特別注意事項。

（3）為保證樣本各組分穩(wěn)定所必需的抗凝劑或保護劑等。

（4）能夠保證樣本穩(wěn)定的儲存、處理和運輸方法

重點明確以下內(nèi)容：

樣本類型、處理、保存期限及保存條件（短期、長期）和運輸條件等。可否采用肝素抗凝血漿、檸檬酸鈉抗凝血漿、EDTA抗凝血漿。特殊體液標(biāo)本還應(yīng)詳細描述對采集規(guī)范、容器、保存條件等可能影響檢測結(jié)果的要求。比如尿液樣本不能為晨尿，pH低于6的尿液樣本如需長期保存，則應(yīng)該加NaOH溶液調(diào)整至近中性（pH7.5±0.5）等。

9.【檢驗方法】

詳細說明試驗操作的各個步驟，包括：

（1）試劑配制方法、注意事項；

（2）試驗條件：溫度、時間、測定主/副波長、比色杯光徑、試劑用量、樣本用量、測定方法、反應(yīng)類型、反應(yīng)方向、反應(yīng)時間等以及試驗過程中的注意事項；

（3）校準(zhǔn)：校準(zhǔn)品的使用方法、注意事項、校準(zhǔn)曲線的繪制；

（4）質(zhì)量控制：質(zhì)控品的使用方法、對質(zhì)控結(jié)果的必要解釋以及推薦的質(zhì)控周期等；

（5）檢驗結(jié)果的計算：應(yīng)明確檢驗結(jié)果的計算方法，超出線性范圍的樣本應(yīng)進行稀釋。

10.【參考區(qū)間】

應(yīng)注明常用樣本類型及反應(yīng)方式的正常參考區(qū)間，并說明參考值確定方法。建議注明“由于地理、人種、性別和年齡等差異，建議各實驗室建立自己的參考區(qū)間”。

11.【檢驗結(jié)果的解釋】

說明可能對檢驗結(jié)果產(chǎn)生影響的因素，在何種情況下需要進行確認試驗。

12.【檢驗方法的局限性】

（1）說明檢測結(jié)果僅供臨床參考，不能單獨作為確診或排除病例的依據(jù)。

（2）說明該檢驗方法由于哪些原因會使測量結(jié)果產(chǎn)生偏離，或測量結(jié)果還不能完全滿足臨床需要。如：干擾（膽紅素、血紅蛋白、甘油三酯等）等。

13.【產(chǎn)品性能指標(biāo)】

至少應(yīng)詳述以下性能指標(biāo)，性能指標(biāo)應(yīng)不低于產(chǎn)品技術(shù)要求中有關(guān)技術(shù)指標(biāo)的要求。

（1）試劑空白吸光度；

（2）分析靈敏度；

（3）準(zhǔn)確度；

（4）精密度（重復(fù)性和批間差）；

（5）線性范圍（線性相關(guān)系數(shù)和線性偏差）。

14.【注意事項】

應(yīng)至少包括以下內(nèi)容：

（1）本試劑盒的檢測結(jié)果僅供臨床參考，對患者的臨床診治應(yīng)結(jié)合其癥狀/體征、病史、其他實驗室檢查及治療反應(yīng)等情況綜合考慮。

（2）本試劑盒僅供體外檢測使用，試劑中含有的化學(xué)成分應(yīng)說明接觸人體后產(chǎn)生不良的影響后果及應(yīng)急處理措施。

（3）采用不同方法學(xué)的試劑檢測所得結(jié)果不應(yīng)直接相互比較，以免造成錯誤的醫(yī)學(xué)解釋，建議實驗室在發(fā)給臨床醫(yī)生的檢測報告中注明所用試劑特征(如參考值范圍或方法學(xué))。

（4）有關(guān)人源組分的警告，如：試劑盒內(nèi)的質(zhì)控品、校準(zhǔn)品或其他人源組分，雖已經(jīng)通過了HBs-Ag、HIV1/2-Ab、HCV-Ab等項目的檢測。但截至目前，沒有任何一項檢測可以確保絕對安全，故仍應(yīng)將這些組分作為潛在傳染源對待。

（5）樣本：對所有樣本和反應(yīng)廢棄物都應(yīng)視為傳染源對待。

（6）其他有關(guān)β2-微球蛋白含量測定的注意事項。

15.【參考文獻】

應(yīng)當(dāng)注明在編制說明書時所引用的參考文獻。

16.【基本信息】

根據(jù)《體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則》的相關(guān)要求編寫。

17.【醫(yī)療器械注冊證書編號/產(chǎn)品技術(shù)要求編號】、【說明書批準(zhǔn)日期及修改日期】。

三、審查關(guān)注點

（一）關(guān)注產(chǎn)品預(yù)期用途有關(guān)的描述是否與臨床研究結(jié)論一致。臨床研究用參比試劑和第三方確認試劑的預(yù)期用途應(yīng)與申請產(chǎn)品預(yù)期用途一致。申報樣本類型應(yīng)在臨床研究中進行驗證。

（二）審查產(chǎn)品技術(shù)要求時應(yīng)注意產(chǎn)品應(yīng)符合GB/T 26124—2011《臨床化學(xué)體外診斷試劑（盒）》有關(guān)規(guī)定。

（三）說明書中預(yù)期用途、儲存條件及有效期、檢驗方法、參考范圍、產(chǎn)品性能指標(biāo)、抗干擾能力等描述應(yīng)分別與臨床研究資料、穩(wěn)定性研究資料、參考區(qū)間研究資料、分析性能評估資料的研究結(jié)論相一致。

（四）凍干試劑應(yīng)提供復(fù)溶穩(wěn)定性研究資料并在說明書【儲存條件及有效期】中說明。

四、名詞解釋

（一）準(zhǔn)確度（Accuracy）

一個測量值與可接受的參考值間的一致程度。

（二）分析特異性（Analytical Specificity）

測量程序只測量被測量物的能力。用于描述檢測程序在樣本中有其他物質(zhì)存在時只測量被測量物的能力。通常以一個被評估的潛在干擾物清單來描述，并給出在特定醫(yī)學(xué)相關(guān)濃度值水平的分析干擾程度（潛在干擾物包括干擾物和交叉反應(yīng)物）。

（三）線性（Linearity）

在給定測量范圍內(nèi)，給出的測量結(jié)果與樣品中實際存在的被測量物的值成比例的能力。線性是描述一個測量系統(tǒng)的測量示值或測量結(jié)果相關(guān)于樣本的賦值符合直線的屬性。

（四）精密度（Precision）

在規(guī)定條件下，相互獨立的測試結(jié)果之間的一致程度。精密度的程度是用統(tǒng)計學(xué)方法得到的測量不精密度的數(shù)字形式表示，如標(biāo)準(zhǔn)差（SD）和變異系數(shù)（CV）。

五、參考文獻

（一）《關(guān)于含有牛、羊源性材料醫(yī)療器械注冊有關(guān)事宜的公告》（國食藥監(jiān)械〔2006〕407號）

（二）《全國臨床檢驗操作規(guī)范》（第四版），中華人民共和國衛(wèi)生部醫(yī)政司

（三）《臨床化學(xué)常用項目自動分析法》（第三版），遼寧科技出版社

β2-微球蛋白檢測試劑盒
（膠乳增強免疫比濁法）注冊技術(shù)審查
指導(dǎo)原則編寫說明

一、指導(dǎo)原則編寫目的

（一）本指導(dǎo)原則編寫的目的是用于指導(dǎo)和規(guī)范β2-微球蛋白檢測試劑盒（膠乳增強免疫比濁法）產(chǎn)品注冊申報過程中審查人員對注冊材料的技術(shù)審評；同時也可指導(dǎo)注冊申請人的產(chǎn)品注冊申報。

（二）本指導(dǎo)原則旨在讓初次接觸該類產(chǎn)品的注冊審查人員對產(chǎn)品診斷方法或原理、主要組分、主要性能指示、臨床用途等各個方面進行基本了解，同時讓技術(shù)審查人員在產(chǎn)品注冊技術(shù)審評時把握基本的要求尺度，以確保產(chǎn)品的安全、有效。

（三）本指導(dǎo)原則中的β2-微球蛋白檢測試劑盒是指基于分光光度法原理對人血清、血漿或其他體液中的β2-微球蛋白含量進行體外定量分析的試劑。

（四）本指導(dǎo)原則中的術(shù)語、定義采用GB/T 26124—2011《臨床化學(xué)體外診斷試劑(盒)》標(biāo)準(zhǔn)的術(shù)語和定義。

二、指導(dǎo)原則編寫依據(jù)

（一）《醫(yī)療器械監(jiān)督管理條例》（國務(wù)院令第650號）

（二）《醫(yī)療器械注冊管理辦法》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局令第4號）

（三）《體外診斷試劑注冊管理辦法》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局令第5號）

（四）《醫(yī)療器械說明書和標(biāo)簽管理規(guī)定》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局令第6號）

（五）《關(guān)于發(fā)布醫(yī)療器械產(chǎn)品技術(shù)要求編寫指導(dǎo)原則的通告》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第9號）

（六）《關(guān)于發(fā)布體外診斷試劑臨床試驗技術(shù)指導(dǎo)原則的通告》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第16號）

（七）《關(guān)于發(fā)布體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則的通告》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第17號）

（八）《中國藥典》2010年版第三部

（九）國家食品藥品監(jiān)督管理部門發(fā)布的其他規(guī)范性文件

三、指導(dǎo)原則部分內(nèi)容編寫考慮

（一）指導(dǎo)原則主要根據(jù)體外診斷試劑產(chǎn)品注冊申報資料的要求，借鑒國家食品藥品監(jiān)督管理部門已發(fā)布的相關(guān)產(chǎn)品注冊技術(shù)審查指導(dǎo)原則的體例進行編寫，以便于注冊技術(shù)審評人員理解。

（二）在產(chǎn)品綜述資料中，全面介紹了該類體外診斷試劑產(chǎn)品的預(yù)期用途、產(chǎn)品描述、方法學(xué)特征、生物安全性評價、研究結(jié)果總結(jié)以及同類產(chǎn)品上市情況介紹等內(nèi)容。

（三）本指導(dǎo)原則不涉及產(chǎn)品作用機理的內(nèi)容，主要描述相應(yīng)的診斷方法和原理。

（四）產(chǎn)品應(yīng)適用的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)中給出了現(xiàn)行有效的國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)（包括產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)和基礎(chǔ)標(biāo)準(zhǔn)）。

（五）產(chǎn)品風(fēng)險管理的要求以YY/T 0316—2008《醫(yī)療器械 風(fēng)險管理對醫(yī)療器械的應(yīng)用》為依據(jù)。

（六）產(chǎn)品的臨床要求依據(jù)《體外診斷試劑臨床試驗技術(shù)指導(dǎo)原則》進行編寫。

（七）依據(jù)新頒布的《醫(yī)療器械說明書和標(biāo)簽管理規(guī)定》和新發(fā)布實施的相關(guān)適用標(biāo)準(zhǔn)編寫了產(chǎn)品說明書、標(biāo)簽和包裝標(biāo)識的要求。

（八）依據(jù)β2-微球蛋白檢測試劑盒（膠乳增強免疫比濁法）相關(guān)信息調(diào)研表確定指導(dǎo)原則中“擬定產(chǎn)品技術(shù)要求”項下主要性能指標(biāo)各項參數(shù)。

四、指導(dǎo)原則編寫單位和人員

本指導(dǎo)原則由重慶市食品藥品監(jiān)督管理局和重慶醫(yī)療器械質(zhì)量檢驗中心共同編寫。