貼敷類(lèi)醫療器械中17種化學(xué)藥物識別及含量測定補充檢驗方法（2022年第12號）

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國家藥監局關(guān)于發(fā)布貼敷類(lèi)醫療器械中17種化學(xué)藥物識別及含量測定補充檢驗方法的公告（2022年第12號）

發(fā)布時(shí)間：2022-01-26

　　根據《醫療器械監督管理條例》第七十六條規定，國家藥監局審核批準《貼敷類(lèi)醫療器械中17種化學(xué)藥物識別及含量測定補充檢驗方法》，現予發(fā)布。

　　特此公告。

　　附件：貼敷類(lèi)醫療器械中17種化學(xué)藥物識別及含量測定補充檢驗方法.doc

國家藥監局
2022年1月25日

貼敷類(lèi)醫療器械中17種化學(xué)藥物
識別及含量測定補充檢驗方法

　　1 適用產(chǎn)品范圍

　　本方法適用于以物理升溫、物理退熱、穴位壓力刺激或者磁場(chǎng)作用等原理的貼敷類(lèi)醫療器械。品名舉例：遠紅外治療貼、醫用冷敷貼、醫用退熱貼、冷敷凝膠、磁療貼、穴位壓力刺激貼等。

　　本方法不適用于以鐵粉氧化升溫致熱為工作原理的熱療貼、熱灸貼等產(chǎn)品。

　　2 規范性引用文件

　　下列文件對于本文件的應用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。

　　GB/T 6682 分析實(shí)驗室用水規格和試驗方法。

　　3 通則

　　3.1本方法中的室溫，如無(wú)特殊規定，應為10 ℃～30 ℃。

　　3.2本方法中試驗用水應符合GB/T 6682的要求。

　　3.3本方法中所用容器如無(wú)特殊規定，應為硅硼酸鹽玻璃容器。

　　3.4本方法中所涉及的量取，應使用符合相應國家標準規定的準確度要求的移液管量取。

　　4 測定方法

　　4.1 概述

　　高效液相色譜儀的二極管陣列檢測器（DAD）能夠進(jìn)行全波長(cháng)掃描，靈敏度較高，且應用普遍、易于操作。高分辨的一級（MS）、二級質(zhì)譜（MS2）數據能夠給出更加準確可靠的結構信息。本方法采用高效液相色譜法（HPLC）進(jìn)行初篩，高分辨液質(zhì)聯(lián)用法（HRMS/MS）或等效的液質(zhì)聯(lián)用法進(jìn)行驗證，驗證后的陽(yáng)性樣品采用高效液相色譜法（HPLC）進(jìn)行含量測定。

　　4.2 供試液的制備

　　取樣品1貼，撕開(kāi)不粘層，展開(kāi)，貼在定量濾紙上，用剪刀裁去多余濾紙，然后將樣品剪成0.5 cm×0.5 cm的小片，置于150 mL燒瓶中，加入甲醇適量將樣品完全浸沒(méi)，70 ℃回流兩次，每次2 h。將浸提液轉移至100 mL容量瓶中，用少量甲醇洗滌樣品三次，合并洗滌液至容量瓶中，用甲醇定容至刻度，搖勻。取上述溶液經(jīng)0.2 μm微孔濾膜過(guò)濾后作為供試液，必要時(shí)可進(jìn)行適當倍數的稀釋。

　　4.3高效液相色譜法

　　4.3.1 儀器與試劑

　　4.3.1.1 儀器

　　高效液相色譜儀，配有二極管陣列檢測器。

　　4.3.1.2 試劑

　　a）甲醇：色譜純，CAS# 67-56-1;

　　b）乙腈：色譜純，CAS# 75-05-8;

　　c）磷酸：分析純，CAS# 7664-38-2;

　　d）17種藥物信息見(jiàn)表1。

表1 17種藥物信息

　　4.3.2藥物對照品儲備溶液的配制

　　分別取4.3.1.2中17種藥物對照品各約10 mg，精密稱(chēng)定，置10 mL棕色容量瓶中，加入甲醇溶解后定容，搖勻，配制成濃度為1 mg/mL的藥物對照品儲備溶液。

　　4.3.3高效液相色譜條件（推薦）

　　4.3.3.1色譜柱：XBridge BEH Shield RP18 2.5 μm 4.6×150 mm，或其他等效色譜柱。

　　4.3.3.2柱溫：35 ℃，樣品室溫度：10 ℃;

　　4.3.3.3流速：1 mL/min;

　　4.3.3.4檢測波長(cháng)：220 nm，掃描范圍：190 nm～400 nm;

　　4.3.3.5進(jìn)樣量：10 μL。

　　4.3.3.6流動(dòng)相：A（pH 3.0的磷酸水溶液）B（甲醇：乙腈 1：1），梯度條件見(jiàn)表2。

表2 HPLC法流動(dòng)相梯度條件

　　4.3.4系統適應性試驗

　　4.3.4.1 分離度

　　取4.3.2中17種藥物對照品儲備溶液各0.1 mL于10 mL容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，制成濃度為10 mg/L的混合對照溶液，取10 μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖，17種對照品的色譜峰與相鄰色譜峰之間的分離度應大于1.5。

　　4.3.4.2 靈敏度

　　取4.3.2中17種藥物對照品儲備溶液適量，分別用甲醇稀釋至表3中“檢出限（LOD）”的濃度，取10 μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖，17種對照品的色譜峰信噪比（S/N）均應大于3:1。

表3 17種藥物靈敏度要求

　　4.4高分辨液質(zhì)聯(lián)用法

　　4.4.1 儀器與試劑

　　4.4.1.1 儀器

　　高分辨液質(zhì)聯(lián)用儀

　　4.4.1.2 試劑

　　a）甲醇：質(zhì)譜純，CAS# 67-56-1;

　　b）乙酸銨：質(zhì)譜純，CAS# 631-61-8;

　　c）17種藥物對照品同4.3.1.2 d）。

　　4.4.2對照品溶液配制

　　同4.3.4.1中濃度為10 mg/L的混合對照溶液配制。

　　4.4.3色譜條件（示例）

　　4.4.3.1色譜柱：Hypersil Gold 100×2.1 mm 1.9 μm，或其他等效色譜柱。

　　4.4.3.2 柱溫：40 ℃，樣品室溫度：10 ℃;

　　4.4.3.3 流速：0.2 mL/min;

　　4.4.3.4 檢測波長(cháng)：220 nm;

　　4.4.3.5進(jìn)樣量：2 μL。

　　4.4.3.6 流動(dòng)相：A（10 mmol/L乙酸銨的水溶液）B（甲醇），梯度條件見(jiàn)表4。

表4 HPLC-HRMS/MS法流動(dòng)相梯度條件

　　4.4.4質(zhì)譜條件（示例）

　　4.4.4.1 儀器型號：Themo Q-Exactive Focus型高分辨液質(zhì)聯(lián)用儀。

　　4.4.4.2 離子源：ESI 掃描模式：正負切換;

　　4.4.4.3 鞘氣：30 arb 輔助氣：8 arb 吹掃氣：0 arb;

　　4.4.4.4 電噴霧電壓：3.0 kV;

　　4.4.4.5 毛細管溫度：320 ℃;

　　4.4.4.6 傳輸透鏡電壓：55.0 %;

　　4.4.4.7 輔助氣加熱溫度：300 ℃;

　　4.4.4.8 17種藥物測定參數見(jiàn)表5。

表5 17種藥物檢測模式、二級能量及碎片離子

　　注：*為基峰

　　4.5藥物識別及其含量測定

　　取4.2制備的供試液及4.3.4.1制備的10 mg/L的混合對照溶液，按照4.3.3的方法進(jìn)樣分析。將二者結果進(jìn)行對比，以保留時(shí)間（tR）及190 nm~400 nm的紫外光譜圖一致性作為初篩依據。

　　取可能含有藥物的供試液及相應藥物對照品溶液，按照4.4.3、4.4.4的方法進(jìn)樣分析。將供試液與對照品溶液的母離子及碎片離子信息進(jìn)行對比，二者一致則確認該樣品中含有相應的藥物成分。

　　取4.3.2中陽(yáng)性樣品中所含藥物的對照品儲備溶液，配制成系列濃度的標準溶液，按照4.3.3的方法進(jìn)樣分析。繪制濃度-峰面積標準曲線(xiàn)，根據峰面積計算樣品中藥物的量。圖1給出了17種藥物的典型色譜圖。

　　4.6其他藥物識別方法

　　本方法中給出了17種藥物的識別和含量測定方法，如關(guān)注其他可能添加的藥物，也可采用經(jīng)方法學(xué)驗證的方法進(jìn)行分析。

　　5 結果判定

　　供試液中不得檢出上述17種藥物成分（檢出限見(jiàn)表3）。

　　起草單位：山東省醫療器械和藥品包裝檢驗研究院

　　復核單位：深圳市藥品檢驗研究院
　　　　　　　安徽省食品藥品檢驗研究院