葡萄糖檢測試劑注冊審查指導原則（2024年第19號）

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葡萄糖檢測試劑注冊審查指導原則

本指導原則旨在指導注冊申請人對葡萄糖檢測試劑注冊申報資料的準備及撰寫(xiě)，同時(shí)也為技術(shù)審評部門(mén)審評注冊申報資料提供參考。

本指導原則是對葡萄糖檢測試劑的一般要求，申請人應依據產(chǎn)品的具體特性確定其中的具體內容是否適用，若不適用，需具體闡述理由及相應的科學(xué)依據，并依據產(chǎn)品的具體特征對注冊申報資料的內容進(jìn)行充實(shí)和細化。

本指導原則是供注冊申請人和技術(shù)審評人員使用的指導文件，不包括審評審批所涉及的行政事項，亦不作為法規強制執行，如有能夠滿(mǎn)足相關(guān)法規要求的其他方法，也可以采用，但應提供詳細的研究資料和驗證資料。應在遵循相關(guān)法規、國家標準、行業(yè)標準的前提下使用本指導原則。

本指導原則是在現行法規、標準體系及當前認知水平下制定的，隨著(zhù)法規、標準體系的不斷完善和科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，本指導原則相關(guān)內容也將適時(shí)進(jìn)行調整。

一、適用范圍

本指導原則適用于采用葡萄糖氧化酶法、己糖激酶法、葡萄糖脫氫酶法等酶學(xué)方法，利用全自動(dòng)、半自動(dòng)生化分析儀或分光光度計，在醫學(xué)實(shí)驗室進(jìn)行人血清、血漿或尿液中葡萄糖定量檢測的臨床化學(xué)體外診斷試劑。

本指導原則不適用于：擬自測用血糖監測系統（包括血糖試紙、質(zhì)控品等），擬用于新生兒的葡萄糖檢測試劑。

對基于其他方法學(xué)的試劑，可能部分要求不完全適用或本文所述內容不夠全面，申請人可以參照本指導原則，根據產(chǎn)品特性對適用部分進(jìn)行評價(jià)或補充其他的評價(jià)資料進(jìn)行相應驗證。

二、注冊審查要點(diǎn)

注冊申報資料的撰寫(xiě)應符合《體外診斷試劑注冊申報資料要求及說(shuō)明》的相關(guān)要求。

（一）監管信息

1.產(chǎn)品名稱(chēng)

產(chǎn)品名稱(chēng)應符合《體外診斷試劑注冊與備案管理辦法》及相關(guān)法規的要求，如葡萄糖測定試劑盒（葡萄糖氧化酶法）。

產(chǎn)品名稱(chēng)一般由三部分組成。第一部分：被測物名稱(chēng)為葡萄糖；第二部分：用途，如測定試劑（盒）；第三部分：方法或者原理，如葡萄糖氧化酶法、己糖激酶法等。

2.分類(lèi)依據

根據《體外診斷試劑分類(lèi)規則》和《體外診斷試劑分類(lèi)子目錄》，葡萄糖測定試劑管理類(lèi)別為Ⅱ類(lèi)，分類(lèi)編碼為6840。

3.其他信息還包括產(chǎn)品列表、關(guān)聯(lián)文件、申報前與監管機構的聯(lián)系情況和溝通記錄以及符合性聲明等文件。

（二）綜述資料

應按《體外診斷試劑注冊申報資料要求及說(shuō)明》的要求提交概述、產(chǎn)品描述、預期用途、申報產(chǎn)品上市歷史等資料。其中，需注意以下內容：

1.概述

應描述葡萄糖測定試劑名稱(chēng)及其確定依據；該產(chǎn)品是用于糖類(lèi)檢測的試劑；描述申報產(chǎn)品預期用途；描述有關(guān)申報產(chǎn)品的背景信息概述或特別細節（如適用），如申報產(chǎn)品的歷史概述、歷次提交的信息，與其他經(jīng)批準上市產(chǎn)品的關(guān)系等。

2.產(chǎn)品描述

2.1產(chǎn)品綜述

描述產(chǎn)品所采用的技術(shù)原理，產(chǎn)品組成，原材料的來(lái)源及制備方法，主要生產(chǎn)工藝，檢驗方法，質(zhì)控品的制備方法及賦值情況等。產(chǎn)品檢測需要進(jìn)行校準，應描述校準品的制備方法及溯源情況。技術(shù)原理包括反應原理，方法學(xué)，測量方法，信號處理方法，數據獲取和解讀方式，分析前處理步驟等。

描述產(chǎn)品主要研究結果的總結和評價(jià),包括分析性能評估、參考區間、穩定性以及臨床評價(jià)等。

描述不同包裝規格之間的差異。

描述產(chǎn)品中使用的生物材料或衍生物（如己糖激酶、葡萄糖氧化酶、葡萄糖脫氫酶、校準品原材料、質(zhì)控品原材料等）的生物學(xué)來(lái)源（如人、動(dòng)物、重組或發(fā)酵產(chǎn)物）和組織來(lái)源（如血液）。人源性材料須對有關(guān)傳染?。℉IV、HBV、HCV等）病原體檢測予以說(shuō)明；其他動(dòng)物源及微生物來(lái)源的材料，應當說(shuō)明其在產(chǎn)品運輸、使用過(guò)程中對使用者和環(huán)境是安全的，并提供相關(guān)的文件。

2.2包裝描述

提供有關(guān)產(chǎn)品包裝信息，包括包裝形狀和材料等。

2.3研發(fā)歷程

闡述申請注冊產(chǎn)品的研發(fā)背景和目的。如有參考的同類(lèi)產(chǎn)品或前代產(chǎn)品，應當提供同類(lèi)產(chǎn)品和/或前代產(chǎn)品的信息，并說(shuō)明選擇其作為研發(fā)參考的原因。

2.4與同類(lèi)和/或前代產(chǎn)品的比較

應著(zhù)重從技術(shù)原理、預期用途、主要組成成分、量值溯源、主要性能指標、參考區間等方面寫(xiě)明擬申報產(chǎn)品與境內、外已上市同類(lèi)產(chǎn)品和/或前代產(chǎn)品之間的主要區別。

3 預期用途

3.1預期用途

說(shuō)明產(chǎn)品用于體外定量檢測人體樣本中的葡萄糖濃度（或含量），明確具體的樣本類(lèi)型如血清、血漿、尿液，適用的樣本類(lèi)型應結合實(shí)際的分析性能研究及臨床研究情況進(jìn)行確認。應明確適用儀器及使用方法（自動(dòng)/半自動(dòng)），樣本采集及保存裝置和/或添加劑（如抗凝劑）使用情況。

3.2臨床適應證

說(shuō)明臨床適應證的發(fā)生率、易感人群、分析物的詳細介紹及與臨床適應證的關(guān)系，相關(guān)的臨床或實(shí)驗室診斷方法。

葡萄糖是存在于人體血液中最主要的碳水化合物，血液中的葡萄糖俗稱(chēng)血糖，它主要來(lái)源于食物經(jīng)消化吸收生成。正常人血液中的葡萄糖由腎小球濾過(guò)到腎小管，腎小管能夠重吸收全部的葡萄糖，所以尿液中不含有葡萄糖。

血液葡萄糖測定在評估機體糖代謝狀態(tài)、診斷糖代謝紊亂相關(guān)疾病，指導臨床醫師制定并適時(shí)調整治療方案等方面具有重要價(jià)值。其升高主要見(jiàn)于生理性血糖升高（如攝入高糖食物、情緒激動(dòng)等）、糖尿病、內分泌疾?。ㄈ缂谞钕俟δ芸哼M(jìn)癥等）、胰腺病變、嚴重的肝臟病變和藥物影響等；降低主要見(jiàn)于生理性低血糖（如饑餓及劇烈運動(dòng)后等）、胰島素分泌過(guò)多、升高血糖的激素（如腎上腺素等）分泌不足。臨床一般將空腹血糖及口服葡萄糖耐量試驗結果作為診斷糖尿病的標準。

尿液葡萄糖俗稱(chēng)尿糖，如果血糖濃度超過(guò)腎閾，則出現糖尿。尿糖升高主要見(jiàn)于糖尿病、腎性糖尿病、甲狀腺功能亢進(jìn)等，內服或注射大量葡萄糖、情緒激動(dòng)及藥物影響等。因所受影響因素較多，尿糖測定一般為糖尿病診斷提供輔助信息。

體液葡萄糖測定目前廣泛應用的為酶法，常用的酶法包括葡萄糖氧化酶法、己糖激酶法和葡萄糖脫氫酶法。

3.3適用人群

適用于糖尿病、內分泌紊亂等病理性變化狀態(tài)下以及妊娠期等健康狀態(tài)下需評估血糖水平、尿糖水平的人群。

3.4預期使用者

使用者為經(jīng)過(guò)專(zhuān)業(yè)培訓的醫務(wù)人員或實(shí)驗室專(zhuān)業(yè)技術(shù)人員。

4.預期使用環(huán)境

預期使用地點(diǎn)為醫學(xué)檢驗實(shí)驗室或醫院、醫療/臨床實(shí)驗室，其檢測過(guò)程中的環(huán)境條件應符合適用儀器正常工作環(huán)境條件，并且試劑儲存需滿(mǎn)足說(shuō)明書(shū)規定的儲存條件及有效期。

（三）非臨床資料

1.產(chǎn)品風(fēng)險管理資料

申請人應考慮產(chǎn)品壽命周期的各個(gè)環(huán)節，從預期用途、可能的使用錯誤、與安全性有關(guān)的特征、已知及可預見(jiàn)的危害等方面的判定以及對患者風(fēng)險的估計進(jìn)行風(fēng)險分析，應符合GB/T 42062《醫療器械風(fēng)險管理對醫療器械的應用》的要求。

應當提供風(fēng)險分析、風(fēng)險評價(jià)、風(fēng)險控制、任何一個(gè)或多個(gè)剩余風(fēng)險的可接受性評定、與產(chǎn)品受益相比，綜合評價(jià)產(chǎn)品風(fēng)險可接受等內容，并說(shuō)明對于每項已判定危害的各個(gè)過(guò)程的可追溯性。

應根據產(chǎn)品的實(shí)際情況充分考慮影響檢測結果的各種因素，并采用合理的控制措施，綜合評估風(fēng)險是否可接受。比如，抗凝劑（草酸鉀-氟化鈉等）可能對檢測結果產(chǎn)生干擾；葡萄糖氧化酶法試劑易受氧氣的干擾，需分析不同海拔等環(huán)境因素造成氧氣含量不同可能對檢測結果產(chǎn)生的干擾，且需分析還原物質(zhì)（如尿素、維生素C、膽紅素等）對檢測結果產(chǎn)生的干擾；葡萄糖脫氫酶法試劑需分析其是否能區別麥芽糖、半乳糖、木糖與葡萄糖，是否會(huì )導致葡萄糖檢測結果假性升高等。

2.體外診斷試劑安全和性能基本原則清單

說(shuō)明產(chǎn)品符合《體外診斷試劑安全和性能基本原則清單》各項適用要求所采用的方法，以及證明其符合性的文件。對于其中不適用的各項要求，應當說(shuō)明理由。

對于包含在產(chǎn)品注冊申報資料中的文件，應當說(shuō)明其在申報資料中的具體位置；對于未包含在產(chǎn)品注冊申報資料中的文件，應當注明該證據文件名稱(chēng)及其在質(zhì)量管理體系文件中的編號備查。

3.產(chǎn)品技術(shù)要求及檢驗報告

3.1產(chǎn)品技術(shù)要求

申請人應當在原材料質(zhì)量和生產(chǎn)工藝穩定的前提下，根據產(chǎn)品研制、前期評價(jià)等結果，依據國家標準、行業(yè)標準及有關(guān)文獻資料，按照《醫療器械產(chǎn)品技術(shù)要求編寫(xiě)指導原則》的有關(guān)要求，編寫(xiě)產(chǎn)品技術(shù)要求。

主要包括以下性能指標：外觀(guān)、裝量、試劑空白吸光度、線(xiàn)性、準確度、分析靈敏度、重復性、批間差、校準品和質(zhì)控品均勻性（如適用）、質(zhì)控品可接受區間（如適用）等。

產(chǎn)品技術(shù)要求建議不低于YY/T 1200《葡萄糖測定試劑盒（酶法）》的要求。若申報產(chǎn)品結構特征、技術(shù)原理、預期用途、使用方式等與標準的適用范圍不一致，申請人應當提出不適用標準的說(shuō)明，并提供經(jīng)驗證的證明性資料。

3.2檢驗報告

應提供符合《醫療器械監督管理條例》《體外診斷試劑注冊與備案管理辦法》及產(chǎn)品技術(shù)要求規定要求的檢驗報告。目前該產(chǎn)品無(wú)相應國家標準品發(fā)布，如有，則優(yōu)先采用國家標準品對其進(jìn)行檢測。

可提交以下任一形式的檢驗報告：

3.2.1具有自檢能力的注冊申請人出具的自檢報告。

3.2.2委托有資質(zhì)的醫療器械檢驗機構出具的檢驗報告。

如產(chǎn)品提交自檢報告，還需按照《醫療器械注冊自檢管理規定》的要求提交相應資料。

4.分析性能研究

申請人應提交在有效質(zhì)量管理體系下生產(chǎn)產(chǎn)品的所有分析性能評估資料，對于每項分析性能的研究都應包括研究目的、試驗設計、研究方法、可接受標準、試驗數據、統計方法等詳細資料。分析性能研究的試驗方法，可以參考《定量檢測體外診斷試劑分析性能評估注冊審查指導原則》。

分析性能評估時(shí)應將試劑、儀器和所選用的校準品、質(zhì)控品作為一個(gè)整體進(jìn)行評價(jià)，評估整個(gè)系統的性能是否符合要求。有關(guān)分析性能評估的背景信息也應在申報資料中有所體現，包括試驗時(shí)間、地點(diǎn)、檢驗人員、適用儀器、試劑規格和批號、所選用的校準品和質(zhì)控品、樣本來(lái)源等。

用于分析性能評估的樣本，應盡量與預期適用的真實(shí)臨床樣本一致，并按照說(shuō)明書(shū)描述的方式進(jìn)行樣本采集、處理、運輸和保存。如特定濃度的樣本難以獲得，可采用不同濃度的樣本進(jìn)行混合。

如申報產(chǎn)品適用不同的機型，需要提交在不同機型上進(jìn)行評估的資料。應采用一個(gè)或多個(gè)機型，進(jìn)行充分的試劑分析性能建立研究，對于其他機型，應分析各適用機型的工作原理、檢測方法、反應條件控制、信號處理等，如基本相同，可基于風(fēng)險分析對已建立的分析性能指標進(jìn)行合理驗證。如試劑包含不同包裝規格，需對各包裝規格間的差異進(jìn)行分析或驗證。如不同規格間存在性能差異，需采用每個(gè)包裝規格產(chǎn)品進(jìn)行分析性能評估；如不同規格間不存在性能差異，需要詳細說(shuō)明各規格間的差別及可能產(chǎn)生的影響，采用具有代表性的包裝規格進(jìn)行分析性能評估。

對于本試劑，建議著(zhù)重對以下分析性能進(jìn)行研究：

4.1樣本穩定性

為防止血液樣本中葡萄糖降解，血液樣本采集后應及時(shí)分離血清或血漿，血漿樣本應使用抗凝劑抗凝，尿液樣本應采集24小時(shí)尿。

申請人應充分考慮實(shí)際使用過(guò)程中樣本采集、處理、運輸及保存等各個(gè)階段的條件，對適用的不同類(lèi)型樣本的穩定性分別進(jìn)行評價(jià)并提交研究資料，內容包括建議的保存條件、添加劑（如抗凝劑）和運輸條件（如涉及）等。

樣本穩定性應考慮在不同儲存條件（室溫保存、冷藏和冷凍）下對不同類(lèi)型樣本進(jìn)行有效期驗證，建議申請人選擇合理溫度范圍/溫度點(diǎn)，每間隔一定的時(shí)間段對儲存樣本進(jìn)行穩定性驗證，從而確認樣本在不同溫度下儲存的有效期。冷凍儲存的樣本需考慮凍融次數對穩定性的影響并進(jìn)行驗證。

4.2適用的樣本類(lèi)型

血清、血漿、尿液是葡萄糖檢測的適宜樣本，如果試劑適用于多種樣本類(lèi)型，應采用合理方法評價(jià)每種樣本類(lèi)型的適用性。

其中，針對血清、血漿樣本，可選擇具有統計學(xué)意義數量的樣本進(jìn)行樣本一致性的同源比對研究。

血液樣本與尿液樣本不具有可比性，應對每種樣本類(lèi)型分別進(jìn)行分析性能評估。

4.3空白限（LOB）、檢出限（LOD）和定量限（LOQ）研究

4.3.1空白限

4.3.1.1 空白限建立

LOB的建立建議使用儀器在多天內使用多個(gè)試劑批次對多個(gè)獨立的空白樣本進(jìn)行重復檢測不少于2次，并滿(mǎn)足最少測試結果要求，其中血清、血漿空白樣本不易獲得，可使用樣本稀釋劑、緩沖液、生理鹽水、純水和類(lèi)似的基質(zhì)等替代物作為空白樣本。每個(gè)試劑批次至少需要獲得60個(gè)空白樣本測定結果，對測試結果進(jìn)行統計分析，判斷測試結果是否為正態(tài)分布，進(jìn)而確定使用參數分析或非參數分析法計算空白限。

4.3.1.2 空白限驗證

LOB的驗證需選擇至少2個(gè)空白樣本（不同于建立的樣本），采用建立方式在使用儀器上多天內使用多個(gè)試劑批次對空白樣本進(jìn)行試驗。每個(gè)試劑批次至少需要獲得20個(gè)檢測結果，計算符合要求的檢測結果比例是否滿(mǎn)足預設的臨界值，則4.3.1.1建立的空白限得到驗證。

4.3.2檢出限

4.3.2.1檢出限建立

LOD一般由多個(gè)獨立的低濃度（含有分析物）樣本的檢測結果，結合LOB進(jìn)行計算獲得。LOD的建立建議使用儀器在多天內使用多個(gè)試劑批次對多個(gè)獨立的低濃度樣本進(jìn)行重復檢測不少于2次，并滿(mǎn)足最少測試結果要求。每個(gè)試劑批次至少需要獲得60個(gè)低濃度樣本測定結果，對測試結果進(jìn)行統計分析，判斷測試結果是否為正態(tài)分布，進(jìn)而確定使用參數分析或非參數分析法計算檢出限。

4.3.2.2檢出限驗證

LOD的驗證需選擇至少2個(gè)樣本（檢出限濃度樣本），在多天內進(jìn)行試驗。每個(gè)試劑批次至少需要獲得20個(gè)檢測結果，計算符合要求的檢測結果比例，如果比例符合統計學(xué)要求/預設的臨界值，則建立的LOD得到驗證。

4.3.3定量限

4.3.3.1定量限建立

LOQ應滿(mǎn)足預設準確度指標，即考慮偏倚和精密度的要求?？墒褂?.4.1中所述參考物質(zhì)作為樣本，如涉及將樣本稀釋至低濃度水平，應確保稀釋液不引起明顯的基質(zhì)效應，且在低濃度區間呈線(xiàn)性。LOQ的建立建議使用儀器在多天內使用多個(gè)試劑批次對多個(gè)獨立的已知濃度的低濃度樣本進(jìn)行重復檢測不少于3次，并滿(mǎn)足最少測試結果要求。每個(gè)試劑批次至少需要獲得36個(gè)已知濃度生物低濃度樣本測定結果，對測試結果進(jìn)行統計分析，根據臨床需求和室間質(zhì)量評價(jià)的允許誤差設定總誤差目標值（TE目標值），計算總誤差TE，滿(mǎn)足TE＜TE目標值的最低樣本濃度被作為該批號的LOQ。

4.3.3.2定量限驗證

LOQ的驗證需選擇至少2個(gè)定量限濃度樣本，在多天內進(jìn)行試驗。每個(gè)試劑批次至少需要獲得20個(gè)檢測結果，計算符合要求的檢測結果比例，如果比例符合統計學(xué)要求/預設的臨界值，則4.3.3.1建立的LOQ得到驗證。

4.4正確度

對正確度的評價(jià)包括參考物質(zhì)檢測、方法學(xué)比對、回收試驗等方法，申請人可根據實(shí)際情況選擇下述方法之一進(jìn)行研究：

4.4.1參考物質(zhì)檢測

參考物質(zhì)包括具有互換性的有證參考物質(zhì)、標準物質(zhì)、參考測量程序賦值的臨床樣本等。目前血糖有已發(fā)布的有證參考物質(zhì)，有檢驗醫學(xué)溯源聯(lián)合委員會(huì )（The Joint Committee for Traceability in Laboratory Medicine，JCTLM）列表推薦的ID LC-MS/MS葡萄糖參考測量程序、美國疾病控制與預防中心（Communicable Disease Center，CDC）葡萄糖己糖激酶參考方法等；尿糖暫無(wú)有證參考物質(zhì)，有JCTLM列表推薦的葡萄糖德國臨床化學(xué)會(huì )（Deutsche Vereinte Gesellschaft ftir Klinische Chemie und Laboratoriumsmedizin，DGKL）參考方法等。

建議采用2～3個(gè)水平的參考物質(zhì)，代表試劑測量區間內的不同濃度，其中應盡量包括醫學(xué)決定水平或參考區間上/下限附近的濃度。進(jìn)行多次重復檢測，采用檢測結果平均值與參考量值計算偏倚。

4.4.2方法學(xué)比對

采用申報試劑與合理的比較測量程序同時(shí)檢測臨床樣本，通過(guò)兩者的比對研究和偏倚估計，進(jìn)行申報試劑的準確度評價(jià)。比較測量程序可選擇同類(lèi)試劑或者參考測量程序。臨床樣本的濃度水平應覆蓋申報試劑的測量區間。在性能建立時(shí)，建議對每個(gè)樣本重復檢測，以平均值或中位數進(jìn)行回歸分析，并評價(jià)醫學(xué)決定水平或參考區間上/下限濃度的偏倚。

在實(shí)施方法學(xué)比對前，應分別對擬申報試劑和比較測量程序進(jìn)行初步評估，只有在確認兩者質(zhì)量都分別符合各自成品質(zhì)量檢驗標準后方可進(jìn)行比對試驗。方法學(xué)比對時(shí)應注意質(zhì)量控制、樣本類(lèi)型、濃度分布范圍并對結果進(jìn)行合理的統計學(xué)分析。

4.4.3回收試驗

目前有葡萄糖純品。

在人源樣本中加入一定體積純品配制的標準溶液（標準溶液的體積不超過(guò)總體積10%，加入標準溶液后樣本總濃度必須在試劑測定范圍內），每個(gè)濃度重復測定3次，按公式計算回收率，回收率應在申請人給定范圍內。

R=[C×（V0+V）－C0×V0）]/（V×CS）×100%

式中：

R —回收率；

V —加入標準溶液的體積；

V0 —人源樣本的體積；

C —人源樣本加入標準溶液后的測定濃度；

C0 —人源樣本的測定濃度；

Cs —標準溶液的濃度。

4.5精密度研究

精密度由隨機測量誤差決定，通常用標準差、方差或變異系數表示。應根據各測量條件對檢測結果影響程度的分析，設計合理的精密度試驗方案進(jìn)行評價(jià)，包括重復性、實(shí)驗室內精密度、實(shí)驗室間精密度和批間（lot-to-lot）精密度。

針對本產(chǎn)品的精密度評價(jià)提出以下要求：

4.5.1對可能影響檢測精密度的主要變量進(jìn)行驗證，除檢測試劑本身的影響外，還應對操作者、測量?jì)x器、測量程序、試劑批次(lot)、校準（校準品批次，校準周期）、運行（run）、時(shí)間、地點(diǎn)、環(huán)境條件（實(shí)驗室溫度、濕度、空氣質(zhì)量、管理等）等要素進(jìn)行相關(guān)的驗證。

4.5.2合理的精密度評價(jià)周期，例如：為期至少20天的檢測，每天運行2次，每次運行2個(gè)重復樣本，從而對批內/批間、日內/日間的精密度進(jìn)行綜合評價(jià)；或采用3×5×5試驗模型，3個(gè)實(shí)驗室，在5天對同一樣本進(jìn)行測試，每天運行1個(gè)分析批，每個(gè)分析批重復5次測試，從而對重復性、實(shí)驗室內精密度、室間精密度、批間精密度進(jìn)行評估。

4.5.3精密度研究用樣本一般應為臨床實(shí)際檢測樣本或其混合物，必要時(shí)可進(jìn)行稀釋、添加高濃度物質(zhì)或采用基質(zhì)合理的質(zhì)控品。樣本濃度一般包括測量區間高、中、低在內的至少3個(gè)水平，濃度水平應在試劑盒的測量范圍內且有一定的臨床意義，應包含醫學(xué)決定水平或參考區間上/下限濃度附近的樣本。

4.6分析特異性

應評估分析待測樣本中和試劑使用過(guò)程中潛在的交叉反應和干擾物質(zhì)，并對干擾和交叉的程度進(jìn)行量化。

應充分考慮干擾物質(zhì)對檢測結果的影響。申請人可參考《定量檢測體外診斷試劑分析性能評估注冊審查指導原則》并結合實(shí)際情況選擇適用的干擾物質(zhì)進(jìn)行評價(jià)。

常見(jiàn)的內源性干擾物質(zhì)包括膽紅素、血紅蛋白、甘油三酯等，常見(jiàn)的外源性干擾物質(zhì)包括樣本添加劑（如抗凝劑等）、常用藥物（如抗壞血酸等）及其代謝物、患者群體使用的藥物及其代謝物、膳食物質(zhì)、樣本收集或處理過(guò)程中接觸到的物質(zhì)，樣本污染物；亦應考慮文獻中已報道的對類(lèi)似試劑或測量程序存在干擾的物質(zhì)。

研究的干擾物濃度應覆蓋臨床樣本中的最高濃度（最差情形），并對干擾的程度進(jìn)行量化。待評價(jià)的葡萄糖樣本濃度建議采用至少2個(gè)分析物水平的樣本，其濃度應在醫學(xué)決定水平或參考區間上/下限附近。葡萄糖氧化酶法產(chǎn)品需要考慮還原性物質(zhì)干擾，如還原性藥物維生素C、對乙酰氨基酚、多巴胺、布洛芬，以及樣本中尿酸、膽紅素、谷胱甘肽等還原性物質(zhì)產(chǎn)生競爭性抑制，導致測定結果偏低。此外，因該方法學(xué)的反應過(guò)程需要氧氣參與，如產(chǎn)品使用校準曲線(xiàn)代替校準品進(jìn)行校準，還需考慮海拔高度試驗（氧分壓）的影響。

葡萄糖脫氫酶法產(chǎn)品需要考慮麥芽糖、半乳糖、木糖干擾。

4.7線(xiàn)性區間、測量區間、擴展測量區間及可報告區間

4.7.1線(xiàn)性區間

線(xiàn)性區間的研究，需采用高值和零濃度/低值濃度的樣本按比例精確配制的一系列不同濃度的樣本。線(xiàn)性區間建立時(shí)，需配制出較預期線(xiàn)性區間更寬的至少9個(gè)左右不同濃度的樣本（不包括零濃度樣本），每個(gè)樣本進(jìn)行多次重復檢測，根據可接受線(xiàn)性偏差和各濃度的重復性，確定檢測次數。采用重復檢測均值和預期值進(jìn)行直線(xiàn)回歸分析，建議采用加權最小二乘回歸等分析方法，提供散點(diǎn)圖、線(xiàn)性回歸方程、線(xiàn)性相關(guān)系數（r）及線(xiàn)性偏差，判斷結果是否滿(mǎn)足可接受標準。優(yōu)先采用真實(shí)臨床樣本進(jìn)行試驗。當高濃度臨床樣本無(wú)法獲得時(shí)，可以采用添加的方式獲得高濃度樣本，添加體積不得超過(guò)總體積的10%。 當低濃度/零濃度臨床樣本無(wú)法獲得時(shí)，可采用稀釋的方法獲得低濃度樣本，但稀釋不應對樣本產(chǎn)生基質(zhì)效應，可通過(guò)回收、線(xiàn)性或其他適當的方法予以證明。

驗證線(xiàn)性區間時(shí)，可將接近線(xiàn)性區間上限的高值樣本按一定比例稀釋至少為5個(gè)不同濃度，每一濃度的樣本至少重復測定2次，計算其平均值，求出線(xiàn)性方程。

4.7.2測量區間

測量區間，也稱(chēng)分析測量區間，在該區間內，臨床樣本在未經(jīng)稀釋、濃縮，或非常規測量程序中步驟的其他前處理情況下，檢測結果的線(xiàn)性偏差、不精密度和偏倚均在可接受范圍內。測量區間下限為定量限，線(xiàn)性區間包含測量區間。

4.7.3擴展測量區間和可報告區間

如對超出測量區間濃度的樣本可進(jìn)行稀釋后檢測，應研究合適的稀釋液和稀釋倍數，從而確定試劑的擴展測量區間和可報告區間。兩者上限均為測量區間上限×稀釋倍數，擴展測量區間的下限為測量區間上限，可報告區間下限為檢出限。

4.8試劑空白吸光度

用純化水或空白樣本測試試劑（盒），重復測定2次，求出均值即為試劑空白吸光度，應符合企業(yè)規定要求，且己糖激酶法試劑應不大于0.6，氧化酶法試劑應不大于0.2。

4.9分析靈敏度

用已知濃度的樣本測試試劑（盒），記錄在試劑盒規定參數下產(chǎn)生的吸光度改變。換算為n單位的吸光度差值（△A），應符合企業(yè)規定要求。

4.10校準品/質(zhì)控品

申請人應對校準品的溯源情況進(jìn)行詳細描述，提供溯源鏈，并對溯源的具體步驟，溯源鏈逐級的量值傳遞的方式、不確定度、互換性等進(jìn)行詳細描述。

目前血糖參考方法有JCTLM列表推薦的ID LC-MS/MS葡萄糖參考測量程序、CDC葡萄糖己糖激酶參考方法等；目前尿糖參考方法有JCTLM列表推薦的葡萄糖DGKL參考方法等。建議校準品溯源至參考方法或參考物質(zhì)。

質(zhì)控品參照《質(zhì)控品注冊審查指導原則——質(zhì)控品賦值研究》提交在所有適用機型上進(jìn)行的賦值和驗證資料。

校準品、質(zhì)控品還需參照YY/T 1549《生化分析儀用校準物》、YY/T 1662《生化分析儀用質(zhì)控物》，對質(zhì)控品的可接受區間/值以及校準品/質(zhì)控品的均勻性進(jìn)行評價(jià)。

如校準品/質(zhì)控品的基質(zhì)不同于臨床常用樣本類(lèi)型，還應提交基質(zhì)效應研究資料。

5.穩定性研究資料

一般應包含研究方案、報告和數據三部分內容。

5.1實(shí)時(shí)穩定性（貨架有效期）

提交至少三批申報產(chǎn)品在實(shí)際儲存條件下保存至成品有效期后的實(shí)時(shí)穩定性研究資料。明確儲存的環(huán)境條件（如溫度、濕度和光照）及有效期。如產(chǎn)品中包含校準品、質(zhì)控品，應提交被測量漂移（被測量隨時(shí)間的變化）的研究。

5.2使用穩定性

提交申報產(chǎn)品實(shí)際使用期間穩定性的研究資料，應包括所有組成成分的開(kāi)封穩定性。適用時(shí)提交復溶穩定性、機載穩定性及凍融次數研究資料等。如產(chǎn)品中包含校準品、質(zhì)控品，應提交被測量漂移（被測量隨時(shí)間的變化）的研究，還應提交校準頻率或校準穩定性研究資料。明確產(chǎn)品使用的溫度、濕度條件等。

5.3運輸穩定性

提交申報產(chǎn)品可在特定或者預期的條件下運輸的研究資料，應說(shuō)明產(chǎn)品正確運輸的環(huán)境條件（如溫度、濕度、光照和機械保護等）。同時(shí)說(shuō)明產(chǎn)品的包裝方式以及暴露的最差運輸條件。運輸穩定性研究可結合于實(shí)時(shí)穩定性研究中。試劑的穩定性研究應注意選取代表性包裝規格進(jìn)行研究。

試劑穩定性?xún)热莸难芯拷Y果應按照《體外診斷試劑說(shuō)明書(shū)編寫(xiě)指導原則（2023年修訂版）》在說(shuō)明書(shū)【儲存條件及有效期】中進(jìn)行詳細描述。

6.參考區間確定資料

根據適用樣本類(lèi)型（血清/血漿、尿液），給出以下情況下的參考區間：

早餐前（空腹）血糖的正常值

尿液葡萄糖的正常值

除以上參考區間，申報產(chǎn)品也可根據已發(fā)布實(shí)施的診療指南，提供餐后2小時(shí)血糖、口服葡萄糖耐量試驗（OGTT）的參考區間。申報產(chǎn)品可以通過(guò)建立或驗證的方法確定產(chǎn)品的參考區間，可參照《體外診斷試劑參考區間確定注冊審查指導原則》的要求。

無(wú)論是建立自己的參考區間或驗證參考區間，都要確保參考區間的可溯源性，記錄確定參考區間的所有步驟，包括參考個(gè)體的選擇、分析前因素、樣本檢測以及統計分析方法等。

7.其他資料

7.1 三批產(chǎn)品的生產(chǎn)及自檢記錄。

7.2 證明產(chǎn)品安全性、有效性的其他非臨床研究資料。

（四）臨床評價(jià)資料

葡萄糖檢測試劑已列入《免于臨床試驗體外診斷試劑目錄》，申請人可按照《免于臨床試驗的體外診斷試劑臨床評價(jià)技術(shù)指導原則》提交臨床評價(jià)資料。應注意樣本采集、處理、保存等環(huán)節是否符合申報產(chǎn)品和對比產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)要求。應針對血清/血漿、尿液樣本分別開(kāi)展臨床研究。

如預期用途超出《免于臨床試驗體外診斷試劑目錄》中的描述，應進(jìn)行臨床試驗。臨床試驗的倫理、方案的制定以及報告的撰寫(xiě)等臨床試驗資料均應符合《體外診斷試劑臨床試驗技術(shù)指導原則》、《醫療器械臨床試驗質(zhì)量管理規范》的要求。

當待評價(jià)試劑與對比試劑結果不一致時(shí)，可能源于待評價(jià)試劑或對比試劑的誤差，不一致結果可通過(guò)“診斷準確度標準”或其他合理方法進(jìn)行確認并分析原因，確認結果不應納入統計分析。

（五）產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)和標簽樣稿

產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)的所有內容均應與申請人提交的注冊申報資料中的相關(guān)研究結果保持一致，如某些內容引用自參考文獻，則應以規范格式對此內容進(jìn)行標注，并單獨列明參考文獻的相關(guān)信息。

以下僅對葡萄糖檢測試劑說(shuō)明書(shū)的重點(diǎn)內容進(jìn)行詳細說(shuō)明，說(shuō)明書(shū)其他內容應根據《體外診斷試劑說(shuō)明書(shū)編寫(xiě)指導原則》要求進(jìn)行編寫(xiě)。

1.【產(chǎn)品名稱(chēng)】

通用名稱(chēng)，試劑名稱(chēng)由三部分組成：被測物名稱(chēng)、用途、方法或原理。

例如：葡萄糖測定試劑盒（己糖激酶法）。

2.【預期用途】

首段說(shuō)明試劑盒用于體外定量測定人血清、血漿或尿液等樣本中的葡萄糖。

第二段應詳細說(shuō)明試劑盒適用于糖尿病、內分泌紊亂等病理性變化狀態(tài)下以及妊娠期、體檢等健康狀態(tài)下人群評估血糖水平、尿糖水平。

其余段落對葡萄糖進(jìn)行背景介紹、說(shuō)明相關(guān)的臨床或實(shí)驗室診斷方法；說(shuō)明與預期用途相關(guān)的臨床背景情況；說(shuō)明被測分析物與臨床適應證的關(guān)系。明確與葡萄糖檢測相關(guān)的臨床適應證背景情況。說(shuō)明相關(guān)的臨床或實(shí)驗室診斷方法。

3.【檢驗原理】

應結合產(chǎn)品主要成分簡(jiǎn)要說(shuō)明檢驗的原理、方法，必要時(shí)可采取圖示方法表示，檢驗原理的描述應結合產(chǎn)品主要組成成分、被測物和產(chǎn)物的關(guān)系進(jìn)行描述。

例如：葡萄糖和三磷酸腺苷（ATP）在己糖激酶（HK）的催化作用下發(fā)生磷酸化反應，生成葡萄糖-6-磷酸（G-6-P）和二磷酸腺苷（ADP）。G-6-P在葡萄糖-6-磷酸脫氫酶（G-6-PD）催化下脫氫，氧化生成6-磷酸葡萄糖酸（6-PG），同時(shí)使煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADP+) 或煙酰胺腺嘌呤二核苷酸 (NAD+ )分別還原成還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH）或還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）。

反應式如下：

4.【主要組成成分】

4.1對于產(chǎn)品中包含的試劑組分：

4.1.1說(shuō)明各組分的名稱(chēng)、數量、裝量。

4.1.2說(shuō)明各組分中的核心反應成分（如酶等）、基質(zhì)、防腐劑。生物活性材料應提供其生物學(xué)來(lái)源和特性。應明確酶組分在基質(zhì)中的濃度、比例等信息。

4.1.3多組分試劑盒應明確說(shuō)明不同批號試劑盒中各組分是否可以互換。

4.1.3如盒中包含耗材，應列明耗材名稱(chēng)、數量等信息。

4.2需要但未提供的試劑：

對于產(chǎn)品中不包含，但對檢測必需的試劑如單獨注冊的校準品/質(zhì)控品等應列明各試劑的產(chǎn)品名稱(chēng)、注冊人（備案人）、貨號及其注冊證編號（備案編號）

4.3需要但未提供的軟件

若有配合使用的單獨注冊的軟件，列明軟件名稱(chēng)、發(fā)布版本號、注冊人、注冊證號等信息。

4.4對于校準品和質(zhì)控品

4.4.1說(shuō)明濃度水平、核心反應成分及其生物學(xué)來(lái)源，明確基質(zhì)、防腐劑等。

4.4.2注明校準品的定值及其溯源性。

4.4.3注明質(zhì)控品的靶值和靶值范圍。

4.4.4若校準品或質(zhì)控品的值為批特異，可注明批特異，并附單獨的靶值。

4.5如配合使用試劑或軟件正在進(jìn)行注冊（備案），注冊證編號（備案編號）可先留空，在完成注冊（備案）后由注冊人（備案人）自行添加。

5.【儲存條件及有效期】

首段明確貨架保存條件和有效期，如2～8℃保存，有效期12個(gè)月。同時(shí)明確特殊保存條件，如禁止冷凍、光線(xiàn)和濕度要求等。

其他段落描述以下內容：

明確各組分的使用穩定性，包括開(kāi)封保存條件和保存時(shí)長(cháng)、凍融次數、機載穩定性等。

明確生產(chǎn)日期、使用期限/失效日期/有效期至見(jiàn)標簽。

若各組分的保存條件不一致，應分別描述。

若各組分的有效期不同，則試劑盒的有效期為最短保存時(shí)間。

6.【適用儀器】

應明確可適用的具體品牌、型號的儀器。

7.【樣本要求】

重點(diǎn)明確以下內容：樣本類(lèi)型、處理方式、樣本收集過(guò)程中的注意事項、保存期限及保存條件等。冷藏/冷凍樣本檢測前是否須恢復室溫，可凍融次數。血漿樣本應注明對抗凝劑的要求。尿液樣本還應詳細描述對采集條件等可能影響檢測結果的要求。

8.【檢驗方法】

詳細說(shuō)明試驗操作的各個(gè)步驟，包括：

8.1試劑配制方法、注意事項。

8.2試驗條件：溫度、時(shí)間、測定波長(cháng)、試劑用量、樣本用量反應時(shí)間等以及試驗過(guò)程中的注意事項。

8.3校準程序：校準品的使用方法、注意事項、校準曲線(xiàn)的繪制。校準有效期及需要重新校準的情況，推薦的校準周期等。

8.4質(zhì)量控制程序：質(zhì)控品的使用方法、對質(zhì)控結果的必要解釋等。

8.5檢驗結果的計算：應明確檢驗結果的計算或表達方法

9.【參考區間】

明確參考區間，并簡(jiǎn)要說(shuō)明建立和驗證參考區間的基本信息，包括：樣本量、人群特征（如性別、年齡、種族等）和采用的統計學(xué)方法。

10.【檢驗結果的解釋】

應根據其臨床意義對可能出現的結果進(jìn)行合理的解釋。

說(shuō)明在何種情況下應對樣本進(jìn)行重復測試，以及在重復測試時(shí)需要采取的樣本處理方式。

若超過(guò)線(xiàn)性區間上限的高濃度樣本可稀釋后測定，則應說(shuō)明樣本的最大可稀釋倍數、稀釋溶液等信息并提供經(jīng)確認的稀釋程序。

11.【檢驗方法的局限性】

綜合產(chǎn)品的預期用途、臨床背景、檢測方法等信息，對可能出現的局限性進(jìn)行相關(guān)說(shuō)明，申請人選擇適用的條款在產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)中予以闡述。至少應包括以下內容：

說(shuō)明檢測結果僅供臨床參考，不能單獨作為確診或排除病例的依據。

12.【產(chǎn)品性能指標】

此項內容為分析性能研究資料和臨床評價(jià)資料的總結，應:

12.1概括描述每項分析性能研究如準確度/正確度、精密度、靈敏度、測量區間及可報告區間、分析特異性、高劑量鉤狀效應、包容性等適用項目的研究方法和結果。

12.2概括描述臨床評價(jià)包括免于臨床試驗的臨床評價(jià)和臨床試驗的方法和結果。

13.【注意事項】

13.1注明必要的注意事項，如本品僅用于體外診斷等。

13.2采用不同方法學(xué)的試劑檢測所得結果不應直接相互比較，以免造成錯誤的醫學(xué)解釋?zhuān)唤ㄗh實(shí)驗室在發(fā)給臨床醫生的檢測報告注明所用試劑特征。

13.3如該產(chǎn)品含有人源或動(dòng)物源、微生物源性物質(zhì)，應給出具有潛在感染性的警告。如：試劑盒內的質(zhì)控品、校準品或其他人源組分， 雖已經(jīng)通過(guò)了HBs-Ag、HIV1/2-Ab、HCV-Ab 等項目的測定，但截至目前，沒(méi)有任何一項測定可以確保絕對安全，故仍應將這些組分作為潛在傳染源對待。

13.4廢棄物的處理方式。對所有樣本和反應廢棄物都應視為傳染源進(jìn)行處理。

（六）質(zhì)量管理體系文件

應按《體外診斷試劑注冊申報資料要求及說(shuō)明》的要求提交質(zhì)量管理體系文件。

三、參考文獻

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[18]國家藥品監督管理局.體外診斷試劑注冊申報資料要求及說(shuō)明:國家藥監局通告2021年第122號[Z].