革蘭陰性桿菌鑒定試劑注冊指導原則（2024年第19號）

附件：革蘭陰性桿菌鑒定試劑注冊指導原則（2024年第19號）.doc

革蘭陰性桿菌鑒定試劑注冊審查指導原則

本指導原則旨在指導注冊申請人對革蘭陰性桿菌鑒定試劑注冊申報資料的準備及撰寫(xiě)，同時(shí)也為技術(shù)審評部門(mén)審評注冊申報資料提供參考。

本指導原則是對革蘭陰性桿菌鑒定試劑的一般要求，申請人應依據產(chǎn)品的具體特性確定其中內容是否適用，若不適用，需具體闡述理由及相應的科學(xué)依據，并依據產(chǎn)品的具體特性對注冊申報資料內容進(jìn)行充實(shí)和細化。

本指導原則是供注冊申請人和技術(shù)審評人員使用的指導性文件，但不包括審評審批所涉及的行政事項，亦不作為法規強制執行，應在遵循相關(guān)法規的前提下使用本指導原則。如果有能夠滿(mǎn)足相關(guān)法規要求的其他方法，也可以采用，但是需要提供詳細的研究資料和驗證資料，相關(guān)人員應在遵循相關(guān)法規的前提下使用本指導原則。

本指導原則是在現行法規、標準體系及當前認知水平下制定的，隨著(zhù)法規、標準體系不斷完善及科學(xué)技術(shù)不斷發(fā)展，本指導原則相關(guān)內容也將適時(shí)進(jìn)行調整。

一、適用范圍

本指導原則適用于利用生化鑒定原理，鑒定臨床醫學(xué)相關(guān)的需氧型、兼性厭氧型、厭氧型革蘭陰性桿菌的試劑（革蘭陰性桿菌及其鑒定簡(jiǎn)介見(jiàn)附件）；檢測樣本為從臨床樣本中分離的純菌。

對于其他方法，可能部分要求不適用或本文所述內容不夠全面，申請人可以根據產(chǎn)品特性對適用部分進(jìn)行評價(jià)或補充其他的評價(jià)資料進(jìn)行相應性能的驗證，但需闡述不適用的理由，并說(shuō)明替代方法的科學(xué)合理性。

二、注冊審查要點(diǎn)

（一）監管信息

1.產(chǎn)品名稱(chēng)及分類(lèi)編碼

產(chǎn)品名稱(chēng)應符合《體外診斷試劑注冊與備案管理辦法》及相關(guān)法規的要求。根據《體外診斷試劑分類(lèi)子目錄》，該產(chǎn)品按照第二類(lèi)體外診斷試劑管理，分類(lèi)編碼為6840。

2.其他資料包括產(chǎn)品列表、關(guān)聯(lián)文件、申報前與監管機構的聯(lián)系情況和溝通記錄以及符合性聲明等文件。

（二）綜述資料

綜述資料主要包括概述、產(chǎn)品描述、預期用途、申報產(chǎn)品上市歷史以及其他需要說(shuō)明的內容。

1.概述

1.1通用名稱(chēng)及確定依據

根據《體外診斷試劑注冊與備案管理辦法》要求，體外診斷試劑的產(chǎn)品名稱(chēng)一般由被測物質(zhì)名稱(chēng)、用途和方法/原理三部分組成，例如：本產(chǎn)品被測物為革蘭陰性桿菌，用途為鑒定試劑（盒）或鑒定板/卡，檢測方法/原理為生化法（包括比色法、比濁法），據此確定產(chǎn)品的通用名稱(chēng)為革蘭陰性桿菌鑒定試劑盒（比色法/比濁法）或革蘭陰性桿菌鑒定板/卡（比色法/比濁法）。

1.2描述申報產(chǎn)品預期用途。

一般根據細菌對氧氣的耐受性或鏡下形態(tài)，將預期用途表述為：

本產(chǎn)品用于需氧型革蘭陰性桿菌的鑒定。

本產(chǎn)品用于兼性厭氧型革蘭陰性桿菌的鑒定。

本產(chǎn)品用于需氧和兼性厭氧型革蘭陰性桿菌的鑒定。

本產(chǎn)品用于厭氧型革蘭陰性桿菌的鑒定。

本產(chǎn)品用于革蘭陰性桿菌的鑒定。

申請人可依據產(chǎn)品所涵蓋的革蘭陰性桿菌的具體特征對預期用途進(jìn)行聲稱(chēng)。

1.3如適用，描述有關(guān)申報產(chǎn)品的背景信息概述或特別細節，如：申報產(chǎn)品的歷史概述、歷次提交的信息，與其他經(jīng)批準上市產(chǎn)品的關(guān)系等。

2.產(chǎn)品描述

2.1產(chǎn)品綜述

2.1.1描述產(chǎn)品所采用的技術(shù)原理，產(chǎn)品組成，原材料的來(lái)源及制備方法，主要生產(chǎn)工藝，檢驗方法。

注：技術(shù)原理包括反應原理（如生化法），方法學(xué)（如比色法/比濁法），信號處理方法，結果解讀方式等。

2.1.2描述產(chǎn)品主要研究結果的總結和評價(jià)，包括分析性能評估、陽(yáng)性判斷值、穩定性及臨床評價(jià)等。

2.1.3描述不同包裝規格之間的差異。

2.1.4描述產(chǎn)品中使用的生物材料或衍生物（如適用）的生物學(xué)來(lái)源（如人、動(dòng)物、病原體、重組或發(fā)酵產(chǎn)物）和（或）組織來(lái)源（如血液）。人源性材料（如適用）須對有關(guān)傳染?。℉IV、HBV、HCV等）病原體檢測予以說(shuō)明；其他動(dòng)物源及微生物來(lái)源的材料，應當說(shuō)明其在產(chǎn)品運輸、使用過(guò)程中對使用者和環(huán)境是安全的，并提供相關(guān)的文件。

2.2包裝描述

描述試劑盒的各個(gè)組分、所有規格及不同規格的劃分說(shuō)明，試劑盒組分、外包裝及組分包裝所用的材質(zhì)、包裝的形狀，外包裝盒上面應包含產(chǎn)品名稱(chēng)、批號、生產(chǎn)日期及失效日期、注冊人/生產(chǎn)企業(yè)名稱(chēng)、生產(chǎn)地址、聯(lián)系方式等信息。

2.3研發(fā)歷程

闡述申請注冊產(chǎn)品的研發(fā)背景和目的。如有參考的同類(lèi)產(chǎn)品或前代產(chǎn)品，應當提供同類(lèi)產(chǎn)品或前代產(chǎn)品的信息，并說(shuō)明選擇其作為研發(fā)參考的原因。

2.4與同類(lèi)和/或前代產(chǎn)品的比較

對已有同類(lèi)產(chǎn)品和/或前代產(chǎn)品上市，申請人應提供其產(chǎn)品名稱(chēng)、生產(chǎn)企業(yè)、注冊情況，并列表比較申報產(chǎn)品與同類(lèi)產(chǎn)品和/或前代產(chǎn)品在技術(shù)原理、預期用途、使用方法、性能指標、臨床應用情況等方面的異同。

3.預期用途及使用環(huán)境

3.1明確產(chǎn)品預期用途，寫(xiě)明適用儀器（如適用）、使用方法（自動(dòng)/半自動(dòng)/手工）、檢測類(lèi)型（定性）、樣本類(lèi)型（來(lái)源于臨床樣本分離的純菌）等。

3.2臨床適應證、適用人群

臨床上，革蘭陰性桿菌引起的感染呈多樣性，究其原因為包含的細菌種類(lèi)廣泛，感染部位不同，病原菌的種類(lèi)也千差萬(wàn)別，如細菌血流感染常檢出的菌株有大腸埃希菌、鮑曼不動(dòng)桿菌、肺炎克雷伯菌、銅綠假單胞菌等；呼吸道感染常檢出的菌株有鮑曼不動(dòng)桿菌、銅綠假單胞菌、大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌等；腸道感染常檢出的菌株有痢疾志賀菌、大腸埃希菌、傷寒沙門(mén)菌；泌尿道感染常檢出的菌株有大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、銅綠假單胞菌等；傷口膿液常檢出的菌株有大腸埃希菌、銅綠假單胞菌、鮑曼不動(dòng)桿菌等；顱內感染常檢出的菌株有鮑曼不動(dòng)桿菌、銅綠假單胞菌等。

寫(xiě)明產(chǎn)品需專(zhuān)業(yè)人員使用。明確產(chǎn)品在實(shí)驗室中使用，如有可能會(huì )影響其安全性和有效性的環(huán)境條件（如溫度、濕度、海拔）應注明。

4.申報產(chǎn)品上市歷史：如適用，應當提交申報產(chǎn)品的下列資料：上市情況、不良事件和召回、銷(xiāo)售/不良事件及召回率。

5.其他需說(shuō)明的內容

5.1除申報產(chǎn)品外，檢測系統的其他組成部分，包括但不限于：適用儀器、質(zhì)控菌株、獨立軟件等基本信息，及其在檢測中發(fā)揮的作用，必要時(shí)應提交相應的說(shuō)明書(shū)。

5.2如適用，對于已獲得批準的檢測系統的其他組成部分，應當提供注冊證編號和國家藥監局官方網(wǎng)站公布的注冊證信息。

（三）非臨床資料

1.產(chǎn)品風(fēng)險管理資料 

申請人應考慮產(chǎn)品壽命周期的各個(gè)環(huán)節，從預期用途、可能的使用錯誤、與安全性有關(guān)的特征、已知可預見(jiàn)的危害等方面的判定，以及對患者風(fēng)險的估計進(jìn)行風(fēng)險分析，應符合GB/T 42062《醫療器械風(fēng)險管理對醫療器械的應用》的要求。

風(fēng)險管理資料應包含以下內容：

1.1概述：簡(jiǎn)要介紹風(fēng)險管理資料的編制依據、適用范圍、產(chǎn)品描述（名稱(chēng)、用途、適用機型）、風(fēng)險管理計劃及實(shí)施情況等。

1.2風(fēng)險管理人員及其職責分工：明確風(fēng)險管理小組成員及職責，制定風(fēng)險管理流程圖，明確風(fēng)險管理活動(dòng)的評審要求等。

1.3風(fēng)險來(lái)源分析：明確風(fēng)險可能的來(lái)源（如產(chǎn)品故障、使用條件或環(huán)境差異、用戶(hù)端風(fēng)險、產(chǎn)品壽命等）。

1.4預期用途和安全性有關(guān)特征的判定：以GB/T 42062附錄C為基礎，判定產(chǎn)品預期用途和與安全性有關(guān)的特性，判定已知和可預見(jiàn)的危害、對患者風(fēng)險的評估，并形成問(wèn)題清單。申請人可以根據產(chǎn)品特征確定其他可能危害，采取相應控制措施，確保產(chǎn)品風(fēng)險降至可接受的程度。

1.5風(fēng)險分析、風(fēng)險控制和風(fēng)險控制措施：對每一判定為危害的不正確結果的風(fēng)險進(jìn)行分析，并制定相應的風(fēng)險控制方案及措施。

1.6綜合剩余風(fēng)險的可接受性評價(jià)：對比采取風(fēng)險控制措施前后的風(fēng)險情況，對剩余風(fēng)險的可接受性進(jìn)行評價(jià)。

1.7風(fēng)險控制措施驗證：對風(fēng)險控制措施的有效性進(jìn)行驗證分析。

2.體外診斷試劑安全和性能基本原則清單

申請人需提供《體外診斷試劑安全和性能基本原則清單》，并說(shuō)明產(chǎn)品為了符合適用的各項要求所采用的方法，以及證明其符合性的文件。對于不適用的各項要求，應說(shuō)明理由。

3.產(chǎn)品技術(shù)要求及檢驗報告

3.1產(chǎn)品技術(shù)要求

產(chǎn)品技術(shù)要求根據《醫療器械產(chǎn)品技術(shù)要求編寫(xiě)指導原則》等規范性文件進(jìn)行編制。產(chǎn)品技術(shù)要求主要包含包裝規格及其劃分說(shuō)明、性能指標和檢驗方法，性能指標主要包括外觀(guān)、準確性、重復性、批間差、pH值（如適用）、裝量（如適用）等。

3.2檢驗報告

在保證產(chǎn)品原材料和生產(chǎn)工藝穩定可靠的基礎上，采用在符合醫療器械質(zhì)量管理體系相關(guān)要求的條件下生產(chǎn)的產(chǎn)品進(jìn)行檢驗?？商峤灰韵氯我恍问降臋z驗報告：

3.2.1具有自檢能力的注冊申請人出具的注冊自檢報告，自檢應符合《醫療器械注冊自檢管理規定》。

3.2.2委托有資質(zhì)的醫療器械檢驗機構出具的檢驗報告。

4.分析性能研究

申請人應采用在生產(chǎn)質(zhì)量管理體系下生產(chǎn)的試劑對分析性能進(jìn)行研究，應當包括研究方案、數據、結果分析和總結，提供證據的總結及證據充分性的論證。

如申報產(chǎn)品適用不同的機型，需要提交在不同機型上進(jìn)行評估的資料。如申報產(chǎn)品包含不同的包裝規格，需要對各包裝規格進(jìn)行分析或驗證：若存在性能差異，需采用每個(gè)包裝規格產(chǎn)品進(jìn)行性能評估；若不存在性能差異，需要詳細說(shuō)明各規格間的差別及可能產(chǎn)生的影響。

分析性能研究中使用的菌株建議不超過(guò)5代，并對其來(lái)源進(jìn)行說(shuō)明。

建議著(zhù)重對以下性能進(jìn)行研究：

4.1適用的樣本類(lèi)型與樣本穩定性

本產(chǎn)品適用的樣本類(lèi)型為臨床分離的純菌，為了保證待測菌的活性，臨床采樣后，建議立即接種純化菌，應對制備的菌懸液及純化后菌株的保存條件、保存期限和接種濃度進(jìn)行研究。

4.2 pH值（如適用）

根據產(chǎn)品特點(diǎn)，如培養基未包被在固體載物中時(shí)，鑒定培養液或鑒定稀釋液對pH有特殊要求時(shí)，需要限定pH值，用pH計測定，結果應符合申請人設定的pH范圍。

4.3準確性

根據試劑板條鑒定范圍，選取不少于2株的菌株進(jìn)行準確性試驗，菌株可使用標準菌株或臨床菌株，如ATCC、CMCC、CICC的參考菌株等。窄譜（單菌屬）鑒定板條選取至少2株；廣譜板條以企業(yè)宣稱(chēng)為主，每屬選取至少1株，鑒定結果應與已知菌相符。

臨床常見(jiàn)或重要菌屬（種）參考YY/T 1531 附錄A：

腸桿菌科鑒定：大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌或產(chǎn)酸克雷伯菌、普通變形桿菌或奇異變形桿菌、陰溝腸桿菌或產(chǎn)氣腸桿菌、黏質(zhì)沙雷菌；

非發(fā)酵菌鑒定：鮑曼不動(dòng)桿菌、銅綠假單胞菌、嗜麥芽窄食單胞菌；

嗜血桿菌鑒定：流感嗜血桿菌或副流感嗜血桿菌；

厭氧菌鑒定：脆弱擬桿菌；

苛養菌鑒定：流感嗜血桿菌。

4.4精密度

4.4.1重復性

重復性指在重復性條件下的精密度。申請人應根據試劑板條類(lèi)別，選取菌株（可使用臨床菌株，當臨床菌株難以獲取時(shí)，可以使用標準菌株）對同一批號試劑進(jìn)行檢測，重復檢測不少于3個(gè)板條，鑒定結果應與已知結果相符。

4.4.2中間精密度

應考慮運行、時(shí)間、操作者、儀器和地點(diǎn)等影響精密度的條件，設計合理的精密度試驗方案進(jìn)行評價(jià)。

批間精密度應用菌株（可使用臨床菌株，當臨床菌株難以獲取時(shí)，可以使用標準菌株）對至少3個(gè)批號試劑進(jìn)行檢測，每一批號采用不少于3個(gè)鑒定板條進(jìn)行檢測，鑒定結果應與已知結果相符。

申請人應設定合理的精密度評價(jià)周期，具體方案可參考性能評價(jià)相關(guān)文件進(jìn)行。

用于精密度評價(jià)的臨床菌株或標準菌株應至少包含3個(gè)菌屬（廣譜）或菌株（窄譜），每株檢測至少20次，鑒定結果應與所用菌屬或菌株名稱(chēng)相符。

5.穩定性研究資料

穩定性研究主要包括實(shí)時(shí)穩定性（貨架有效期）、使用穩定性（如適用）、運輸穩定性等，注冊申請人可根據實(shí)際需要選擇合理的穩定性研究方案。穩定性研究資料應包括研究方法的確定依據、具體的實(shí)施方案、詳細的研究數據以及結論。對于實(shí)時(shí)穩定性研究，應提供至少三批樣品在實(shí)際儲存條件下保存至成品有效期后的研究資料。

上述研究結果應在說(shuō)明書(shū)【儲存條件及有效期】項中載明。

6.陽(yáng)性判斷值研究

生化鑒定涉及多個(gè)生化反應指標，其最終結果需要結合各個(gè)指標的結果進(jìn)行綜合判斷，目前綜合判斷的方法主要包括雙歧索引法（雙歧分類(lèi)法）、表解法和數值分類(lèi)法等，申請人應依據產(chǎn)品的特性建立合理的鑒定方法，并對相應的鑒定方法充分的論證。

雙歧索引法（雙歧分類(lèi)法）是根據細菌的主要特性和次要特性，按照“非此即彼”的原則依次往下區分，直至將細菌準確區分到最小鑒定單位；表解法是通過(guò)表格的形式，列出有一定關(guān)聯(lián)性的細菌進(jìn)行相同生化試驗的結果；數值分類(lèi)法是以細菌的各種特性和反應是同等重要的為理論基礎，根據每種生化反應在不同細菌中出現的概率進(jìn)行全面分析而得出結果。

申請人如采用數值分類(lèi)法建立鑒定可信度，應考慮菌株的不同類(lèi)別。鑒定可信度指生化鑒定結果的可信賴(lài)程度，即待測菌生化反應譜與數據庫中建庫菌生化反應譜的匹配程度，匹配程度越高，結果越可信，申請人應考慮鑒定結果的可信度，可根據待測菌與數據庫匹配度給出一定的閾值，明確參數確定的依據。

本指導原則適用于臨床樣本中分離的純菌的鑒定，純菌的生化特征是明確的。對于手工檢測的產(chǎn)品，可直接將檢測結果與比色卡進(jìn)行對比，從而判斷鑒定結果。

（四）臨床評價(jià)資料

該產(chǎn)品列入《免于臨床試驗體外診斷試劑目錄》，申請人應按照《免于臨床試驗的體外診斷試劑臨床評價(jià)技術(shù)指導原則》提交臨床評價(jià)資料。如免臨床試驗的相關(guān)指導原則有更新，應符合相應的指導原則要求。

申請人可將待評價(jià)試劑與境內已上市產(chǎn)品進(jìn)行比對，證明待評價(jià)試劑與已上市產(chǎn)品實(shí)質(zhì)等同，或與參考測量程序/診斷準確度標準檢測結果具有良好的一致性。此處所述實(shí)質(zhì)性等同，指預期用途相同，且具有相同的安全性與有效性。

申請人也可通過(guò)臨床試驗的方式進(jìn)行臨床評價(jià)，臨床試驗的倫理、方案的制定以及報告的撰寫(xiě)等臨床試驗資料均應符合《體外診斷試劑臨床試驗技術(shù)指導原則》的要求，相關(guān)資料簽章應符合《醫療器械臨床試驗質(zhì)量管理規范》的要求。

1.對比試劑的選擇

免于臨床試驗的體外診斷試劑，如采用《免于臨床試驗的體外診斷試劑臨床評價(jià)技術(shù)指導原則》所述方式進(jìn)行方法學(xué)對比，應通過(guò)比對分析確定與待評價(jià)試劑相適宜的境內已上市產(chǎn)品作為對比試劑。待評價(jià)試劑與對比試劑的比對分析項目見(jiàn)表1，比對分析項目包括但不限于表1所列項目，可根據實(shí)際情況進(jìn)行修改。

申請人應首先對待評價(jià)試劑與境內已上市產(chǎn)品的預期用途進(jìn)行比對分析。預期用途是指體外診斷試劑的一般用途或功能，包括樣本類(lèi)型、被測物和適應證等。適應證是指本產(chǎn)品治療監測或輔助診斷的疾病或狀態(tài)，包括適用人群。

對比試劑需滿(mǎn)足以下條件：

境內已經(jīng)取得上市許可；

與待評價(jià)試劑具有相同的預期用途；

優(yōu)先選擇與待評價(jià)試劑檢測結果偏差較小的試劑，不建議選擇性能劣于待評價(jià)試劑的作為對比試劑。

如通過(guò)對比分析無(wú)法證明待評價(jià)試劑與境內已上市產(chǎn)品實(shí)質(zhì)等同，或與參考測量程序/診斷準確度標準檢測結果具有良好的一致性，應通過(guò)臨床試驗的方式對申報試劑進(jìn)行評價(jià)。

2.試驗地點(diǎn)

試驗過(guò)程由申請人進(jìn)行管理并負責試驗數據的真實(shí)性、合規性及完整性。境外申請人如需進(jìn)行中國境內開(kāi)展的方法學(xué)比對研究，應通過(guò)其在中國的代理人在中國境內開(kāi)展試驗。

申請人也可以提交在境外完成的試驗資料，資料內容應滿(mǎn)足本指導原則的技術(shù)要求。申請人還應充分考慮流行病學(xué)差異、受試人群的差異、使用的環(huán)境與條件差異等對研究結果產(chǎn)生的可能影響。必要時(shí)，申請人應針對差異因素在我國境內進(jìn)行補充研究。

3.試驗人員

試驗操作人員應為具有相應試驗能力的專(zhuān)業(yè)技術(shù)人員，并熟悉待評價(jià)試劑和對比試劑的檢測流程。

4.試驗樣本

應采用與預期用途一致的來(lái)源于人體樣本（如血液、腦脊液等）分離的菌株進(jìn)行試驗，樣本背景信息應清晰，樣本來(lái)源應可溯源。樣本背景信息包括但不限于：樣本來(lái)源、唯一且可追溯的編號、樣本類(lèi)型和其他與該檢測相關(guān)的背景信息（如年齡、性別等）。

樣本采集方式及穩定性應符合待評價(jià)試劑和對比試劑說(shuō)明書(shū)有關(guān)要求。

5.試驗時(shí)間

試驗應考慮到臨床實(shí)際使用情況和日間精密度影響，在保證符合樣本穩定性的條件下，設定合理的持續時(shí)間，如3～20天，應對所有樣本進(jìn)行編盲，采用待評價(jià)試劑和對比試劑分別進(jìn)行隨機檢測，整個(gè)試驗應有質(zhì)量控制。

6.試驗方法

試驗方法可參考境內外有關(guān)方法學(xué)比對的技術(shù)指導文件，并重點(diǎn)關(guān)注以下內容。

6.1樣本要求

研究應結合產(chǎn)品鑒定板條的種類(lèi)納入菌株，如廣譜鑒定板涵蓋的菌株種類(lèi)較多，總體樣本例數可能高于《免于臨床試驗的體外診斷試劑臨床評價(jià)技術(shù)指導原則》規定的樣本量的要求。對于適用于革蘭陰性桿菌鑒定的廣譜鑒定板或窄譜鑒定板申請人可參考附件中革蘭陰性桿菌的相關(guān)介紹并根據產(chǎn)品預期用途納入相應菌屬。研究樣本數量將影響可信區間寬度，擴大樣本量，將獲得更窄的可信區間。

申請人應根據產(chǎn)品的預期用途、適用人群、臨床適應證、臨床可接受標準等綜合情況，充分考慮各種影響因素，采用合理的方法確定樣本數量。

6.2數據收集期間檢查

在數據收集過(guò)程中，應對所有數據及時(shí)記錄并檢查。如確定某些異常結果由可解釋的原因引起，應記錄原因并將其剔除出數據分析。如不能確定原因，須將原始結果保留在數據集中。

6.3統計分析

6.3.1同品種方法學(xué)比對研究

申請人應綜合考慮數據特征等因素，確定具體的統計分析方法，并提供其選擇依據。評價(jià)待評價(jià)試劑與對比試劑的一致性，計算待評價(jià)試劑與對比試劑的鑒定結果符合率，計算方法詳情見(jiàn)下表2，總體符合率95%置信區間下限應不低于90%。

鑒定結果符合率：待評價(jià)試劑與對比試劑鑒定結果一致的樣本數占總樣本數的比例。即：鑒定結果符合率=a/n×100%。

6.3.2與參考測量程序或診斷準確度標準進(jìn)行比較研究

如有參考測量程序或診斷準確度標準，也可參照本指導原則“6.3.1同品種方法學(xué)比對研究”章節相關(guān)要求，采用待評價(jià)試劑與參考測量程序或診斷準確度標準進(jìn)行比對研究。參考測量程序指被接受作為提供適合其預期用途的測量結果的測量程序。診斷準確度標準指使用一種方法或聯(lián)合多種方法，包括實(shí)驗室檢測、影像學(xué)檢測、病理和隨訪(fǎng)信息在內的臨床信息，來(lái)界定狀況、事件和關(guān)注特征有無(wú)的標準。

6.4不一致結果的處理

待評價(jià)試劑與對比試劑的不一致可能源于待評價(jià)試劑或對比試劑的誤差，不一致結果可通過(guò)診斷準確度標準或其他合理方法進(jìn)行確認并分析原因，確認結果不應納入統計分析。

6.5統計分析中應注意的問(wèn)題

6.5.1樣本剔除應有合理理由，不可隨意剔除。如確需剔除，應說(shuō)明剔除數量及理由。

6.5.2應參考權威技術(shù)指南等，根據產(chǎn)品適用的統計分析模型，計算符合率。

臨床評價(jià)檢測菌應充分考慮菌株類(lèi)型，應包含產(chǎn)品預期用途所涉及的菌株，對于不常見(jiàn)的臨床菌株可適量采用凍存菌株進(jìn)行研究。

（五）產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)和標簽樣稿

說(shuō)明書(shū)承載了產(chǎn)品預期用途、樣本類(lèi)型、檢驗方法、檢驗結果解釋以及注意事項等重要信息，是指導實(shí)驗室工作人員正確操作、臨床醫生針對檢驗結果給出合理醫學(xué)解釋的重要依據。產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)的格式應符合《體外診斷試劑說(shuō)明書(shū)編寫(xiě)指導原則》的要求，進(jìn)口體外診斷試劑的中文說(shuō)明書(shū)除格式要求外，其內容應盡量保持與原文說(shuō)明書(shū)的一致性，翻譯力求準確且符合中文表達習慣。產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)中相關(guān)技術(shù)內容均應與申請人提交的注冊申報資料中的相關(guān)研究結果保持一致，如某些內容引用自參考文獻，則應以規范格式對此內容進(jìn)行標注，并單獨列明文獻的相關(guān)信息。

下面對革蘭陰性桿菌鑒定試劑說(shuō)明書(shū)的重點(diǎn)內容進(jìn)行詳細說(shuō)明。

1.【預期用途】

應至少包括以下內容：

1.1該產(chǎn)品用于臨床分離的革蘭陰性桿菌的鑒定，適用范圍應結合申報產(chǎn)品的臨床性能的確認情況進(jìn)行描述（如：適用于革蘭陰性桿菌或某個(gè)具體種屬，需氧、兼性厭氧或厭氧等）。

1.2應闡述與預期用途相關(guān)的臨床適應證及背景情況，說(shuō)明相關(guān)的臨床或實(shí)驗室診斷方法等。

2.【檢驗原理】

描述生化鑒定方法、原理等。

描述試劑盒的技術(shù)原理，可結合圖示進(jìn)行說(shuō)明。如反應體系中包含哪些類(lèi)型的反應（如酶活性），如何得到最終的鑒定結果。

3.【主要組成成分】

3.1詳細說(shuō)明試劑盒內各組分的名稱(chēng)、數量及在反應體系中的比例或濃度、最低分裝量等信息，如含有生物源性物質(zhì)，應說(shuō)明其生物學(xué)來(lái)源、活性及其他特性；說(shuō)明不同批號試劑盒中各組分是否可以互換。

3.2試劑盒中不包含但對該項檢測必須的試劑組分，應列出各試劑的產(chǎn)品名稱(chēng)、注冊人（備案人）、貨號及其注冊證編號（備案編號）。

4.【儲存條件及有效期】

試劑盒的實(shí)時(shí)穩定性、開(kāi)封穩定性（如適用）、運輸穩定性（如適用）、凍融次數要求（如涉及）等。

4.1對試劑盒的實(shí)時(shí)穩定性、開(kāi)封穩定性（如適用）等信息做詳細介紹，包括環(huán)境溫濕度、避光條件等影響穩定性的條件。如試劑需要配制，則應對配制后的試劑的儲存條件、穩定性做詳細介紹。

4.2如試劑盒各組分的穩定性不一致，則應對各組分的儲存條件和有效期分別進(jìn)行描述。

4.3對于可以冷凍的試劑應注明凍融次數限制。

4.4注明生產(chǎn)日期、使用期限或失效日期（可見(jiàn)標簽）。

5.【適用儀器】

說(shuō)明可適用的儀器及型號，不能泛指某一系列儀器，并提供與儀器有關(guān)的信息以便用戶(hù)能夠正確選擇使用；若不同規格適用不同機型也應說(shuō)明，且應與分析性能研究資料一致。

6.【樣本要求】

重點(diǎn)明確以下內容

6.1樣本要求：樣本應為臨床分離的純菌。

6.2樣本培養條件要求：應注明樣本培養條件及時(shí)長(cháng)、對于凍存菌株有無(wú)要求。

6.3樣本活化用培養基要求：應注明活化菌株用培養基有無(wú)要求。

6.4樣本保存條件：應注明臨床分離純菌的培養后保存條件。

6.5樣本制備后（菌懸液）保存條件：應注明菌懸液保存條件。

上述描述均應建立在相關(guān)性能評價(jià)及穩定性研究的基礎上。

7.【檢驗方法】

描述自動(dòng)分析的工作流程或者詳細說(shuō)明試驗操作的各個(gè)步驟，例如：

7.1詳細說(shuō)明各試劑組分的稀釋、混合及其他必要的處理程序、試劑的使用方法（自動(dòng)/半自動(dòng)/手工）、注意事項等。

7.2詳細描述待測樣本菌懸液制備方法，包括步驟及注意事項。

7.3描述接種量：加樣濃度、體積等。

7.4描述手工或上機操作等。

7.5質(zhì)量控制方法：質(zhì)量控制的建議及相關(guān)操作步驟等。

8.【陽(yáng)性判斷值】

結合陽(yáng)性判斷值確定的研究資料，列出試劑的陽(yáng)性判斷值，并簡(jiǎn)要說(shuō)明陽(yáng)性判斷值確定的方法。

9.【檢驗結果的解釋】

結合臨床結果應有明確的解釋?zhuān)绯霈F異常情況，可能的原因是哪些，如何處理，應進(jìn)行詳細描述。

10.【檢驗方法局限性】

10.1本試劑盒的檢測結果應結合患者的癥狀/體征、病史、其他實(shí)驗室診斷結果等情況進(jìn)行綜合分析以及解釋?zhuān)坏米鳛榛颊吲R床診治或管理的唯一依據。

10.2變異的菌株可能導致不能正確識別。

11.【產(chǎn)品性能指標】

描述產(chǎn)品性能，包括以下內容：

11.1準確性：說(shuō)明準確性評價(jià)結果。

11.2精密度：說(shuō)明精密度的評價(jià)結果，如：重復性、中間精密度。

12.【注意事項】

應至少包括以下內容：

12.1如產(chǎn)品含有人源或動(dòng)物源性物質(zhì)，應提供具有潛在傳染性的警示性信息。

12.2如產(chǎn)品出現某些顯性性狀時(shí)，應提示相應的措施，如包裝袋破損不得使用等。

12.3臨床實(shí)驗室應嚴格遵守國家生物安全相關(guān)法律法規，對使用的廢棄物進(jìn)行規范處理等。

（六）質(zhì)量管理體系文件

質(zhì)量管理體系文件主要包括生產(chǎn)制造信息、質(zhì)量管理體系程序、管理職責程序、資源管理程序、產(chǎn)品實(shí)現程序質(zhì)量、管理體系的測量/分析/改進(jìn)程序、其他質(zhì)量體系程序信息、質(zhì)量管理體系核查文件。申請人應按照相關(guān)法規要求建立相應的質(zhì)量管理體系，確保產(chǎn)品在符合質(zhì)量管理體系的環(huán)境下生產(chǎn)。

三、參考文獻

[1]國家市場(chǎng)監督管理總局.體外診斷試劑注冊與備案管理辦法:國家市場(chǎng)監督管理總局令第48號[Z].

[2]國家食品藥品監督管理總局.6840體外診斷試劑分類(lèi)子目錄(2013年):國家食品藥品監督管理總局通知242號[Z].

[3]GB/T 42062-2022,醫療器械風(fēng)險管理對醫療器械的應用[S].

[4]國家藥品監督管理局.體外診斷試劑安全和性能基本原則清單:國家藥監局公告2021年第122號[Z].

[5]國家藥品監督管理局.醫療器械產(chǎn)品技術(shù)要求編寫(xiě)指導原則:國家藥監局公告2022年第8號[Z].

[6]國家藥品監督管理局.醫療器械注冊自檢管理規定:國家藥品監督管理局公告2021年126號[Z].

[7]國家藥品監督管理局.免于臨床試驗的體外診斷試劑臨床評價(jià)技術(shù)指導原則:國家藥監局通告2021年第74號[Z].

[8]國家藥品監督管理局.免于臨床試驗體外診斷試劑目錄:國家藥監局通告2021年第70號[Z].

[9]國家藥品監督管理局.體外診斷試劑臨床試驗技術(shù)指導原則:國家藥品監督管理局通告2021年第72號[Z].

[10]國家藥品監督管理局,國家衛生健康委員會(huì ).醫療器械臨床試驗質(zhì)量管理規范:國家藥品監督管理局,國家衛生健康委員會(huì )公告2022年第28號[Z].

[11]國家食品藥品監督管理總局.體外診斷試劑說(shuō)明書(shū)編寫(xiě)指導原則:國家食品藥品監督管理總局通告2014年第17號[Z].

[12]YY/T 1531-2017,細菌生化鑒定系統[S].

附件       

革蘭陰性桿菌及其鑒定簡(jiǎn)介

革蘭陰性菌是指細胞壁較薄，經(jīng)革蘭染色后呈紅色的一類(lèi)細菌。根據鏡下形態(tài)，可分為革蘭陰性桿菌、革蘭陰性球菌。

臨床革蘭陰性桿菌主要包括埃希菌屬、沙門(mén)菌屬、志賀菌屬、克雷伯菌屬、沙雷菌屬、變形桿菌屬、嗜血桿菌屬、假單胞菌屬、不動(dòng)桿菌屬、鮑特菌屬、軍團菌屬、類(lèi)桿菌屬、梭桿菌屬等。

埃希菌屬為兼性厭氧菌，代表菌株為大腸埃希菌；沙門(mén)菌屬為兼性厭氧菌，代表菌株為傷寒沙門(mén)菌、副傷寒沙門(mén)菌；志賀菌屬為兼性厭氧菌，代表菌株為痢疾志賀菌、福氏志賀菌、鮑氏志賀菌、宋內志賀菌；克雷伯菌屬為需氧或兼性厭氧菌，代表菌株為肺炎克雷伯菌；沙雷菌屬為兼性厭氧菌，代表菌株為黏質(zhì)沙雷菌；變形桿菌屬為兼性厭氧菌，代表菌株為普通變形桿菌、奇異變形桿菌；嗜血桿菌屬為兼性厭氧菌，代表菌株為流感嗜血桿菌、副流感嗜血桿菌、溶血嗜血桿菌、副溶血嗜血桿菌；假單胞菌屬為需氧菌，代表菌株為銅綠假單胞菌；不動(dòng)桿菌屬為需氧菌，代表菌株為鮑曼不動(dòng)桿菌；鮑特菌屬為需氧菌，代表菌株為百日咳鮑特菌、副百日咳鮑特菌；軍團菌屬為需氧菌，代表菌株為嗜肺軍團菌；布魯菌屬為需氧菌，代表菌株株為布氏桿菌；類(lèi)桿菌屬為厭氧菌，代表菌株為脆弱類(lèi)桿菌、普通類(lèi)桿菌；梭桿菌屬為厭氧菌，代表菌株為具核梭桿菌、壞死梭桿菌。

根據其對氧氣的耐受性，革蘭陰性桿菌可分為需氧型、兼性厭氧型、厭氧型，如：埃希菌屬為兼性厭氧菌、假單胞菌屬為需氧菌、類(lèi)桿菌屬為厭氧菌。

革蘭陰性桿菌的鑒定是將待測樣本中革蘭陰性桿菌按其生物學(xué)特征與已知革蘭陰性桿菌進(jìn)行比對分析，確定待測樣本中革蘭陰性桿菌的分類(lèi)單元。

革蘭陰性桿菌的實(shí)驗室鑒定方法如顯微鏡法、生化法、血清學(xué)法、質(zhì)譜鑒定、分子生物學(xué)鑒定等。（1）顯微鏡法：使用顯微鏡觀(guān)察目的菌的形態(tài)、大小、染色等特征，該方法對人員的技術(shù)要求較高，且只適用于初步鑒定；（2）生化法：由于不同微生物體內的酶系統、新陳代謝的類(lèi)型等的不同，可導致其對各種物質(zhì)利用后所產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物也不同，利用微生物的生理生化反應來(lái)測定微生物的代謝產(chǎn)物，從而實(shí)現微生物的鑒定，此方法是微生物學(xué)中應用較早且較廣泛的一種方法；（3）血清學(xué)：用含有已知特異性抗體的免疫血清（診斷血清）與分離培養出的待測樣本中純菌或樣本中的抗原進(jìn)行血清學(xué)反應，以確定細菌的種或型；（4）質(zhì)譜鑒定：基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜，通過(guò)建立標準或已知菌的數據庫，結合儀器算法將待測樣本中細菌的蛋白峰與已知細菌比對分析，達到鑒定細菌的目的；（5）分子生物學(xué)：基于分子生物學(xué)原理，檢測方法主要包括DNA堿基比例的測定、核酸分子雜交、16s rDNA序列分析法、全基因組序列的測定等，臨床微生物鑒定應用較多的是核酸分子雜交，根據探針特異性的不同，可以鑒定某一菌型或某一種屬甚至更大菌群，可以準確、快速的進(jìn)行微生物的鑒定。（6）拉曼光譜法：細胞組成中的化合物含量不同，每種化合物都有對應的特征光譜，應用拉曼光譜的分析方法可以通過(guò)生成“全生物指紋”來(lái)區分不同的生物樣品，從而進(jìn)行微生物的鑒定。